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木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】两个基因在大肠杆菌中表达的问题

想把两个基因都通过质粒转入大肠杆菌,一定需要用两种质粒(不同的抗生素标记)吗?可以用一个质粒来做吗?请指点!

1楼2010-03-04 09:00:28

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

引用回帖:

Originally posted by jackiechan at 2010-03-04 09:00:28:
想把两个基因都通过质粒转入大肠杆菌,一定需要用两种质粒(不同的抗生素标记)吗?可以用一个质粒来做吗?请指点!

不可以。
只要一种有抗性的质粒转入，宿主就可以生长了。

Amp 、Kana抗性不是很好搞定的嘛

【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】

13楼2010-03-05 10:02:57

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

引用回帖:

Originally posted by jackiechan at 2010-03-04 10:09:24:
我实际上目的是通过表达代谢途径中的一个关键酶(由这个基因表达)达到使产物合成量增加的目的,而并非为了得到这个基因的产物,是不是将目的基因转入大肠杆菌基因组较好啊,这是不是比较难呀

原来是途径改造啊，当然是插入宿主基因组啦！
这也是很成熟的技术啦，自己去找材料吧。

【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】

14楼2010-03-05 10:06:29

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