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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知
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jackiechan

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】两个基因在大肠杆菌中表达的问题

想把两个基因都通过质粒转入大肠杆菌,一定需要用两种质粒(不同的抗生素标记)吗?可以用一个质粒来做吗?请指点!
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gandalf886

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by jackiechan at 2010-03-04 10:09:24:
我实际上目的是通过表达代谢途径中的一个关键酶(由这个基因表达)达到使产物合成量增加的目的,而并非为了得到这个基因的产物,是不是将目的基因转入大肠杆菌基因组较好啊,这是不是比较难呀

用一个载体表达就可以了,用overlapPCR的方法将两个基因连起来,造成一个操纵子的结构,具体如下:promoter-RBS1-ORF1-RBS2-ORF2-terminator
15楼2010-03-05 13:57:17
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