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zh1987hs

金虫 (著名写手)

分子模拟新手

[交流] 【求助/交流】师姐的实验出现了一个奇怪的现象,求指教

各位虫友:
师姐在利用表达了一种水解酶的重组大肠杆菌进行转化实验时,意外的发现不加IPTG也可以进行转化,那么这个大肠杆菌中也没有乳糖操纵子,这是不是意味着不需要诱导酶也有可能表达呢?
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银杏下

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
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amisking(金币+2): 2010-03-03 12:29
得看所用载体和菌株,有的载体与相应菌株在一起出现本底表达很正常。
3楼2010-03-03 11:51:44
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月月大可

木虫 (著名写手)

★ ★
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1949stone(金币+1): 2010-03-03 23:37
不太理解 “不加IPTG也可以转化”


不加IPTG可以表达的话是一种很正常的现象,没什么可意外的,应为平常用的蛋白胨中都含有微量的乳糖,可以开启表达。
再说了乳糖操纵子自身也有半衰期,可以不需诱导开放,但是这种水平非常低。

[ Last edited by 月月大可 on 2010-3-3 at 12:07 ]
4楼2010-03-03 12:04:13
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zh1987hs

金虫 (著名写手)

分子模拟新手

引用回帖:
Originally posted by 月月大可 at 2010-03-03 12:04:13:
不太理解 “不加IPTG也可以转化”


不加IPTG可以表达的话是一种很正常的现象,没什么可意外的,应为平常用的蛋白胨中都含有微量的乳糖,可以开启表达。
再说了乳糖操纵子自身也有半衰期,可以不需诱导开放, ...

是这样的,师姐的实验是利用生物转化的方法生产染料,照理来说,加了IPTG才能诱导加氧酶的表达,可是实验发现,不加IPTG可以生成大量的产物,转化率还非常的高。按照您的说法,不应该能产生大量的产物啊~请指教
5楼2010-03-03 12:18:39
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zh1987hs

金虫 (著名写手)

分子模拟新手

引用回帖:
Originally posted by 银杏下 at 2010-03-03 11:51:44:
得看所用载体和菌株,有的载体与相应菌株在一起出现本底表达很正常。

谢谢您的指教,我回去查查载体和菌株看看~呵呵
6楼2010-03-03 12:19:45
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