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liujiahui木虫 (著名写手)
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[交流]
【求助/交流】有人自己装Superdex或superose的凝胶柱吗，效果怎样？
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如题，看到superdex-200很多都是和HPLC连用（好像），我们实验室，只是想用这个东西分一下我们的产品，也还不知道分离的效果会怎样。所以不会考虑买预装柱（太贵）。 有人自己装过superdex-200或superose的凝胶柱吗？有什么注意事项没有？一般需要柱长很长吗？是不是要求比较高啊？ 多谢交流！ [ Last edited by liujiahui on 2010-2-12 at 22:52 ] |
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雷到您真是不好意思。可能我没有问明白吧。 1. 我没有问柱子分离的效果怎么样，我只是不知道Superdex或superose分我的样品效果会怎么样。我不知道，我也没有问，只是因为不知道效果会怎样，所以不想花很多钱去买预填充的柱子。 2. 为什么不可以问有什么注意事项呢？Anersham教怎么填柱子的光盘，19刀一张（没好意思跟老板说买）。Gel Filtration的手册里Appendix 1是讲怎么填柱子的，只是Sephadex的讲的比较详细（而且，有好多小配件我是没有的，如reservoir, top adaptor都不知是啥）。既然，公司的预填充柱有生意可做，就说明填柱子是很有学问的。 3. 柱子的长度是由胶料决定的，胶料是由想要分离的样品决定的。我在药学版发的帖子，回复的帖子说脱盐用的G25的柱子通常是短粗的，那么以此类推，Superdex-200的柱子是不是要细长的比较好呢？还是几个短粗的串联比较好呢？怎么样分辨率比较高呢？ 4. 我装过G50的柱子，那个很简单。G100的我也装过，那个的重复性就相对差一点。我还想问，一般的操作步骤上都说，在向G50或G100胶中加入水以后，要把上层的细颗粒倒掉，我想问，一般大家都会倒掉什么样的颗粒呢？倒掉了多少胶呢？我看手册上说，要倒掉25%。我以前都没有严格操作这一步，怎么能分掉25%的胶呢？ G50和G100都是在基本没有人指导的情况下装的，所以一直有一个疑问：1. 柱子里胶的上方水是满的吗？还是水不用加满，上方有空气也可以。我没装过Superdex或Superose的柱子，所以才来问的。 [ Last edited by liujiahui on 2010-2-18 at 00:52 ] |
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