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听雪看山

木虫 (职业作家)

西游家族之T所长

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引用回帖:
Originally posted by wangjiasi at 2010-02-11 13:50:28:
体系不大,可以再大一些,然后加大酶量~
2ng??太少了吧
酶切后可以跑电泳看看是否切开了,如果一点都没切开可能是甲基化的问题

2ng还少吗?这2ng已经出现胡多的载体自连,如果再多自连会更严重吧
开花可要欣赏,然后就去远行;唯有不等花开,才能记得花红。
11楼2010-02-11 16:36:56
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louyiceng

荣誉版主 (知名作家)

优秀版主


听雪看山(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by 听雪看山 at 2010-02-11 16:34:00:


老板怎么会轻易换呢,何况这个也没用完,人家其他人用都好着呢,就我这菜鸟的问题多! 不过老板认为这个试剂公司的没很好啊!呜呜,再给个可行的办法噻

希望虫子帮一帮她
12楼2010-05-05 08:34:11
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rosalie161

金虫 (正式写手)


听雪看山(金币+1):谢谢参与
还是SAP好!
Rosalei.....
13楼2010-05-05 10:21:02
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xpb2005

银虫 (小有名气)


听雪看山(金币+1):谢谢参与
水不会有问题吧    是自己制的水还是随试剂带的DD水?
14楼2010-05-05 10:56:01
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liyong1981

金虫 (正式写手)



听雪看山(金币+1):谢谢参与
顶住。不要急~
15楼2010-05-05 11:09:49
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听雪看山

木虫 (职业作家)

西游家族之T所长

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引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-05-05 11:09:49:
顶住。不要急~

谢谢,经过好几个月,酶切没有问题了。因为用的XmaI在说明里要酶切过夜(16小时)才有更强的效力,后来做出了阳性克隆。

现在问题在于,用了高保真的酶做PCR的,可是3次测序回来序列都不理想,第一次的有一个突变点,第二次和第三次序列里居然出现了内含子。
超郁闷,按理来说cDNA克隆,不应该有内含子的,可是出现了!!不只是必然还是偶然??
开花可要欣赏,然后就去远行;唯有不等花开,才能记得花红。
16楼2010-05-05 17:41:06
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