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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药剂学 » 【求助】G50 和 G100哪个流的快？
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liujiahui

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助】G50 和 G100哪个流的快？

本人正在尝试用G50或G100分一种polymer，分子量为1500左右，另一个成分分子量未知，假定几万吧，用G100分的效果还可以，但是重叠的较为严重，老板建议用G50来分。水是流动相。

可是，我从网上的介绍来看G50过柱子的时候应该比G100走的慢，从理论上来说，G50的胶粒更小，应该流的慢也是可以理解的。但是，我实验做得时候，用同样的柱长，同样的压力下，G50的水滴下的速度明显要比G100快很多，大约1秒钟2滴左右。（60cm左右柱长，2.5 cm内径）。分离效果也没有G100的好。

这个是正常的吗？多谢！

看到网上说PEG是线形分子，所以在排阻色谱柱里显得比球形分子要大。我的另一种分子是用PEG修饰的，还有可能是多修饰，按理说分子量应该很大才对，因为单是核就已经有很高的分子量了，只是那个核不溶于水的，所以无法在柱子上看到它的出峰位置。现在用G50或G100的柱子，虽然能看到分开的趋势，但是，还是基本上重叠在一起。

有没有人做过PEG过排阻柱的，或是看过相关的文献？

多谢各位的解答！

[ Last edited by liujiahui on 2010-2-11 at 00:31 ]
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1楼2010-02-04 05:28:43
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对水过敏

铁虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1):多谢指教！ 2010-02-12 20:24
引用回帖:
Originally posted by liujiahui at 2010-02-11 22:58:06:
多谢，

上一个帖子的基本都能看懂，但这个帖子里的内容就不是很明白：

1. 为什么说：“用到G25了都，这个时候长度的增加对分离效果的帮助就比较不明显” 呢？首先，为什么用的G25，长度就不明显，是说如果用 ...

1.用到G25的意思是，目标和杂质分子量都比较小了，这时候分离效果本身不够好，不像那些上万的分子，和杂质相比MW相差巨大，这时候就算柱子装的长，目标和杂质都不一定分的很开
2.这个我也不清楚，我觉得，这个孔径不是我们想的那种状态，分子筛了都，这和我们想的那种沙子一样的状态就有区别了，不是颗粒小，而是单独的填料粒子里头的孔径小，不知道这么解释对不对。目标是从填料间空隙走的，压缩的话，填料会变形，这个填料变形应该是正确的理论，HPLC上压力无法太高，就是填料机械强度不够造成的，过高的压力，就把填料间空隙全堵死了，不然，提高压力能提高分离效果的。过长的高度可能也会造成填料自己把自己压死了哈，我猜= =
3.superdex是不是就是S系列的填料呢？我也不清楚哈~包装盒在实验室放着呢，我做的就是多糖，不过偏向结构方向，所以我也不清楚生化那边做的多糖是什么样子
赞一下(2人) 回复此楼
鄙视我的人多了去了，你算老几啊！！！
15楼2010-02-12 17:25:42
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匿名

用户注销 (文坛精英)
★
karl2100(金币+1):3Q 2010-02-04 11:17
liujiahui(金币+3):thank you! 2010-02-04 22:09
本帖仅楼主可见
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2楼2010-02-04 07:57:38
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liujiahui

木虫 (著名写手)
Thank you!

我这次完全用一样的泵压，同一根柱子，结果还是G50里的水流出会慢一些。（走完样品用了G100 1.5倍的时间，但是水的流出总量为G100的2/3）我有些担心我以前的结果是不是因为我用的压力太大把胶压坏了。（会发生吗？我不知道胶如果被压坏了应该是什么现象，另外，被压坏的胶还能重复使用吗？）

不过，说同样的泵压只是说，我用的同一个泵，并且没有改它的压力而已。因为随着柱子里水流进的速度比流出的速度快，里面的压力似乎是越来越大，最后都得从上下盖子的缝隙里挤出来的样子。

如果G50的比G100的好，用G25的分是不是更好呢？

谢谢！
引用回帖:
Originally posted by trywpl at 2010-02-04 07:57:38:

不能看水流出的速度，要看成分流出的时间情况。G50孔隙小，利于小分子进入孔隙，大分子进不去，这样大分子就会先流出。G100孔隙大，对于你分离的成分来看，G50可能效果要好些。

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4楼2010-02-04 22:32:37
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liujiahui

木虫 (著名写手)
这次还是同样的条件，结果G50里的水流出来的快了好多，和之前的一样。

究竟是不是正常的呀？

忘有做过这方面工作的虫友解答，不胜感激！
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5楼2010-02-09 00:15:20
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