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liujiahui

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助】G50 和 G100哪个流的快?

本人正在尝试用G50或G100分一种polymer,分子量为1500左右,另一个成分分子量未知,假定几万吧,用G100分的效果还可以,但是重叠的较为严重,老板建议用G50来分。水是流动相。

可是,我从网上的介绍来看G50过柱子的时候应该比G100走的慢,从理论上来说,G50的胶粒更小,应该流的慢也是可以理解的。但是,我实验做得时候,用同样的柱长,同样的压力下,G50的水滴下的速度明显要比G100快很多,大约1秒钟2滴左右。(60cm左右柱长,2.5 cm内径)。分离效果也没有G100的好。

这个是正常的吗?多谢!

看到网上说PEG是线形分子,所以在排阻色谱柱里显得比球形分子要大。我的另一种分子是用PEG修饰的,还有可能是多修饰,按理说分子量应该很大才对,因为单是核就已经有很高的分子量了,只是那个核不溶于水的,所以无法在柱子上看到它的出峰位置。现在用G50或G100的柱子,虽然能看到分开的趋势,但是,还是基本上重叠在一起。

有没有人做过PEG过排阻柱的,或是看过相关的文献?

多谢各位的解答!

[ Last edited by liujiahui on 2010-2-11 at 00:31 ]
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匿名

用户注销 (文坛精英)



karl2100(金币+1):3Q 2010-02-04 11:17
liujiahui(金币+3):thank you! 2010-02-04 22:09
本帖仅楼主可见
2楼2010-02-04 07:57:38
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gzhhs608

铜虫 (初入文坛)

liujiahui(金币+1):thank you! 2010-02-04 22:09
同意楼上
3楼2010-02-04 21:24:40
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liujiahui

木虫 (著名写手)

Thank you!

我这次完全用一样的泵压,同一根柱子,结果还是G50里的水流出会慢一些。(走完样品用了G100 1.5倍的时间,但是水的流出总量为G100的2/3)我有些担心我以前的结果是不是因为我用的压力太大把胶压坏了。(会发生吗?我不知道胶如果被压坏了应该是什么现象,另外,被压坏的胶还能重复使用吗?)

不过,说同样的泵压只是说,我用的同一个泵,并且没有改它的压力而已。因为随着柱子里水流进的速度比流出的速度快,里面的压力似乎是越来越大,最后都得从上下盖子的缝隙里挤出来的样子。

如果G50的比G100的好,用G25的分是不是更好呢?

谢谢!
引用回帖:
Originally posted by trywpl at 2010-02-04 07:57:38:

不能看水流出的速度,要看成分流出的时间情况。G50孔隙小,利于小分子进入孔隙,大分子进不去,这样大分子就会先流出。G100孔隙大,对于你分离的成分来看,G50可能效果要好些。

4楼2010-02-04 22:32:37
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liujiahui

木虫 (著名写手)

这次还是同样的条件,结果G50里的水流出来的快了好多,和之前的一样。

究竟是不是正常的呀?

忘有做过这方面工作的虫友解答,不胜感激!
5楼2010-02-09 00:15:20
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liujiahui

木虫 (著名写手)

PEG流过排阻色谱的情形一般是怎么样的?希望有人前来解答,谢谢!
6楼2010-02-10 00:37:56
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对水过敏

铁虫 (小有名气)


liujiahui(金币+1):谢谢参与
liujiahui(金币+3):多谢!多谢!请问用的柱子有多长? 2010-02-11 00:05
我们都用G10 汗死
我们用G10很快的,都不加压的,自然靠重力的分离效果就很好
通常配合自动收集仪,2分半一换试管,35管全部出完,大概20管道30管出东西
鄙视我的人多了去了,你算老几啊!!!
7楼2010-02-10 16:09:02
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对水过敏

铁虫 (小有名气)


karl2100(金币+1):多谢指教! 2010-02-10 20:26
葡聚糖的型号,就是,后面数字越小,适合分离的东西对应分子量越小,如果目标物分子量太小,用的又是大数字的葡聚糖,就会和其他小分子杂质一起钻进葡聚糖里头去了,就分不开了
G10的话,我分的时候,是糖和盐,单糖都能分出来,算上加的基团,MW大概是400-500,分你的1500该没问题,你用G25试下
鄙视我的人多了去了,你算老几啊!!!
8楼2010-02-10 16:14:52
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liujiahui

木虫 (著名写手)

多谢,多谢!

自动收集哦

请问一试管有多少体积呢?所用柱子的大小是怎样的呢?
引用回帖:
Originally posted by 对水过敏 at 2010-02-10 16:09:02:
我们都用G10 汗死
我们用G10很快的,都不加压的,自然靠重力的分离效果就很好
通常配合自动收集仪,2分半一换试管,35管全部出完,大概20管道30管出东西

9楼2010-02-11 00:07:30
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liujiahui

木虫 (著名写手)

昨天试着用了一下marker,分子量是1000的和2000的,结果分的很开。G50。

我想问,对于您所讲的用G10分开单糖,是指将单糖和盐分开,还是单糖和其他糖分开呢?盐在柱子里是什么时候出来的?

多谢!
引用回帖:
Originally posted by 对水过敏 at 2010-02-10 16:14:52:
葡聚糖的型号,就是,后面数字越小,适合分离的东西对应分子量越小,如果目标物分子量太小,用的又是大数字的葡聚糖,就会和其他小分子杂质一起钻进葡聚糖里头去了,就分不开了
G10的话,我分的时候,是糖和盐, ...

10楼2010-02-11 00:14:56
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