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liujiahui木虫 (著名写手)
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[交流]
【求助】G50 和 G100哪个流的快？
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本人正在尝试用G50或G100分一种polymer，分子量为1500左右，另一个成分分子量未知，假定几万吧 ，用G100分的效果还可以，但是重叠的较为严重，老板建议用G50来分。水是流动相。可是，我从网上的介绍来看G50过柱子的时候应该比G100走的慢，从理论上来说，G50的胶粒更小，应该流的慢也是可以理解的。但是，我实验做得时候，用同样的柱长，同样的压力下，G50的水滴下的速度明显要比G100快很多，大约1秒钟2滴左右。（60cm左右柱长，2.5 cm内径）。分离效果也没有G100的好。 这个是正常的吗？多谢！ 看到网上说PEG是线形分子，所以在排阻色谱柱里显得比球形分子要大。我的另一种分子是用PEG修饰的，还有可能是多修饰，按理说分子量应该很大才对，因为单是核就已经有很高的分子量了，只是那个核不溶于水的，所以无法在柱子上看到它的出峰位置。现在用G50或G100的柱子，虽然能看到分开的趋势，但是，还是基本上重叠在一起。 有没有人做过PEG过排阻柱的，或是看过相关的文献？ 多谢各位的解答！ [ Last edited by liujiahui on 2010-2-11 at 00:31 ] |
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最后，来总结一下这个帖子吧： 主要根据“对水过敏”的介绍，和我自己的实验现象。G50流的比G100的快。 （对水过敏真的是个很有意思的名字，每次见到都会笑一笑，然后觉得很悲伤……） 没有解决的问题有：1. 为什么颗粒小，反而水流的快呢？G100应该孔径更大才对呀，为什么反而流的更慢呢？ 2. 我的样品没有得到让老板满意的分离效果。其实我到最后也不敢确定，我分得另一个组分的分子量究竟是多少。虽然我觉得应该用G25试一试，但是老板建议用G200试一试。结果到网上一查，G200由于使用的时候压力过大，容易塌，基本被superdex-200取代。所以，下一步，我要研究一下这个superdex-200究竟怎么用。准备遇到问题改在“生物科学”版面上求助提问。因为superdex-200主要用来分多糖和蛋白质。 |
14楼2010-02-12 07:37:37
匿名 
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