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fjtcm8772

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】TLC摸索上柱条件。。

我还不知道目标化合物,希望从浸膏中尽量多分出单体,请问在薄层上摸出的条件要把极性降低一半吗?还是直接上? 还有怎么根据薄层选择洗脱梯度?
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匿名

用户注销 (小有名气)

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
karl2100(金币+1):多谢指教! 2010-02-03 12:06
本帖仅楼主可见
2楼2010-02-02 23:52:01
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wb1809v

木虫 (正式写手)

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
karl2100(金币+1):多谢指教! 2010-02-03 12:07
一般教材里说使样本点的rf在0.2~0.3的极性的展开剂作为洗脱剂,冲的时候样品下的挺快,一个柱子一天有可能就冲完,不过分离的效果有可能不是很好,所以我有时就选rf在0.1左右的极性来冲。如果两个点的rf差0.1以上就很好分离,太小了就难了,可以试试别的分离手段。

我也是新手,只知道这些。还有一点我经验就是,有时候冲下来的组分浓度很稀,直接点板检测不到,可以考虑浓缩之后再点,看的就清楚了。
3楼2010-02-03 12:01:09
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hfchenxu

木虫 (正式写手)


karl2100(金币+1):3Q 2010-02-04 11:21
其实中药成分跑薄层首先应确定主要成分的,(你说浸膏应该是中药吧)不能确定成分也会知道中药材的名称,再查相关资料,看看哪种成分含量较多并有效再进行呀。
4楼2010-02-03 12:50:00
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want0075286

金虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
karl2100(金币+1):谢谢应助! 2010-02-04 23:11
1 如果你研究的药材有文献的话,还是先要参考文献,站在前人肩上会很轻松的
2 如没有文献,可参考近缘科属药材的研究文献,对自己的研究也有重要参考价值
3 如都没有的话,还是建议做中草药成分预实验,做常见的鉴别反应(颜色反应),比如盐酸镁粉反应灵敏,结果明显的话说明提取物中有较多的黄酮类成分,可将此类作为主攻目标,指导下一步工作
4 确定研究目标和主攻方向后,可进一步确定研究和操作方法,主要靠薄层色谱来摸索柱色谱分离的条件,如果某个条件下(展开剂系统),你想要的主要成分(斑点大,颜色深等)能够较好地和其它杂杂质分开,此条件即可作为柱色谱分离的依据,一般要比此条件更保守一些上柱,比如薄层条件是6:4,上柱可前推至9:1开始冲洗。一般先尝试经典的展开剂系统,如极性稍小,先试石油醚--乙酸乙酯,极性稍大可试氯仿--甲醇,成分偏酸性可适当在展开剂中加少许弱酸改善分离效果,成分偏碱性同理可适当加碱调节
5楼2010-02-04 22:09:00
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yuanyuan8078

新虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
karl2100(金币+1):谢谢参与交流! 2010-02-05 21:11
引用回帖:
Originally posted by want0075286 at 2010-02-04 22:09:00:
1 如果你研究的药材有文献的话,还是先要参考文献,站在前人肩上会很轻松的
2 如没有文献,可参考近缘科属药材的研究文献,对自己的研究也有重要参考价值
3 如都没有的话,还是建议做中草药成分预实验,做常见的 ...

同意楼上的说法。
做植化分离,文献工作非常重要。文献工作做好了,可以达到事半功倍的效果。
至于目标成分和分离条件的确定,我建议你选择3个极性(小极性、中等极性、大极性)展开剂系统,用硫酸显色,确定相应的目标斑点,然后再选择合适的流动相系统。
在选择流动相系统时,目标斑点Rf值在0.1~0.2范围内,即可上柱分离。
6楼2010-02-05 14:53:04
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