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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请教，pYES2载体可以用于野生型啤酒酵母表达外源蛋白吗？
汕头大学海洋科学接受调剂
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维纳斯的骑士

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请教，pYES2载体可以用于野生型啤酒酵母表达外源蛋白吗？

pYES2载体常和INVSc1营养缺陷型载体一起用来表达外源重组蛋白，它可以直接用于野生型啤酒酵母来做表达吗，当然肯定要先把野生型啤酒酵母做些改造，使其有筛选功能，大家认为这样可行吗、
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1楼 2010-01-29 23:56:02
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)
★
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应该可以。但你打算怎样获得营养缺陷的菌株呢
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2楼2010-01-30 07:30:07
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zier1011

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
应该可以，INVSc1就是因为具有筛选功能——营养缺陷型，才用于做表达的。你要是能把野生型酵母改造成有筛选功能的，当然也可以，只不过你不用营养缺陷用什么呢？
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花还香香的
3楼2010-01-30 09:19:02
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维纳斯的骑士

金虫 (小有名气)
把野生型啤酒酵母的一个基因敲除，在pYES2中带入敲除的基因后转入上述啤酒酵母菌株里表达筛选，这是我的试验思路，可行吗？
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4楼2010-01-30 10:21:26
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gastrodia

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可以，只要野生型的酵母能够筛选即可，一般做转基因都是通过互补实验的缺陷型来鉴定基因，然后通过转野生型来判断在内源基因存在的情况下，外源基因能够提供多大的贡献

[ Last edited by gastrodia on 2010-1-30 at 11:09 ]
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5楼2010-01-30 11:08:20
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zier1011

木虫 (著名写手)
★
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引用回帖:
Originally posted by 维纳斯的骑士 at 2010-01-30 10:21:26:
把野生型啤酒酵母的一个基因敲除，在pYES2中带入敲除的基因后转入上述啤酒酵母菌株里表达筛选，这是我的试验思路，可行吗？

野生型酵母敲除基因后，形成菌株是营养缺陷型，而后可以用作表达菌株。你的实验思路理论上可行，但问题是你何必费这个劲儿？有现成的一样缺陷型菌株不用，自己费劲构建一株营养缺陷型菌株，目的是什么？如果你的目的是表达蛋白，则不必要这么费神费力，但是你如果目的是构建新型的用于表达的酵母缺陷型菌株，则可以尝试。
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花还香香的
6楼2010-02-04 12:05:12
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维纳斯的骑士

金虫 (小有名气)
你说的很对，我试验的目的就是尝试做一个新型营养缺陷型酵母菌株，主要不是用于表达蛋白，虽然肯定要表达某个蛋白才能证明，呵呵
没办法，老板的想法我们只有想办法去做啦
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7楼2010-02-04 14:02:12
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