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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】A431细胞培养
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kikicocofiggo

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】A431细胞培养

求助：我培养A431细胞，复苏后一开始几天还是蛮好的，贴壁也好，但是传代完了，就不怎么贴壁了，细胞也变得很小了，这是为什么呢？我用的培养液是DMEM，10%小牛血清，感觉没问题啊，请教培养过的A431细胞的高手啦！
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人生如戏，戏如人生
1楼 2010-01-28 13:29:42
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yang0071

木虫 (职业作家)
kikicocofiggo(金币+1): 2010-01-28 20:58
kikicocofiggo(金币+1): 2010-03-10 13:58
怎么消化的？时间多长?
估计你是胰酶消化时间太长
重新复苏
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2楼2010-01-28 14:09:22
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liyangmiscap

木虫 (著名写手)
kikicocofiggo(金币+1): 2010-01-28 20:58
kikicocofiggo(金币+1): 2010-03-10 13:58
是否是消化时间太长损伤了细胞？
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愿与你携手，沿河看柳
3楼2010-01-28 19:00:19
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gaozx123

金虫 (小有名气)
kikicocofiggo(金币+1): 2010-01-28 20:58
kikicocofiggo(金币+1): 2010-03-10 13:58
应该是消化过了，在多少温度环境下消化的呀，我一般室温下2分钟，如果放培养箱的话1分钟就OK了。
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4楼2010-01-28 20:46:22
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kikicocofiggo

金虫 (小有名气)
我觉得这不是很可能的啊，我做过的细胞一般都可以消化个10分钟都没有问题的，我倒是消化了十分钟，因为我觉得消化不了，所以用了那么长时间，我在显微镜下看都细胞都没有缩起来，所以消化时间长了。照你们的说话，现在的细胞岂不是不能要了，重新培养为好了？
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人生如戏，戏如人生
5楼2010-01-28 21:00:55
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yang0071

木虫 (职业作家)
kikicocofiggo(金币+3): 2010-03-10 13:58
kikicocofiggo(金币+1): 2010-03-23 22:24
引用回帖:
Originally posted by kikicocofiggo at 2010-01-28 22:00:55:
我觉得这不是很可能的啊，我做过的细胞一般都可以消化个10分钟都没有问题的，我倒是消化了十分钟，因为我觉得消化不了，所以用了那么长时间，我在显微镜下看都细胞都没有缩起来，所以消化时间长了。照你们的说话， ...

消化10分钟没问题？ 你的胰酶浓度是多少？0.25%基本上1-2分钟足够了
镜下细胞没有缩倒是很奇怪，那么就是胰酶过期了可能，然后你强行吹打细胞，细胞破裂
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6楼2010-01-29 07:35:55
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