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kikicocofiggo

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】A431细胞培养

求助:我培养A431细胞,复苏后一开始几天还是蛮好的,贴壁也好,但是传代完了,就不怎么贴壁了,细胞也变得很小了,这是为什么呢?我用的培养液是DMEM,10%小牛血清,感觉没问题啊,请教培养过的A431细胞的高手啦!
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人生如戏,戏如人生
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yang0071

木虫 (职业作家)

kikicocofiggo(金币+1): 2010-01-28 20:58
kikicocofiggo(金币+1): 2010-03-10 13:58
怎么消化的?时间多长?
估计你是胰酶消化时间太长
重新复苏
2楼2010-01-28 14:09:22
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liyangmiscap

木虫 (著名写手)

kikicocofiggo(金币+1): 2010-01-28 20:58
kikicocofiggo(金币+1): 2010-03-10 13:58
是否是消化时间太长损伤了细胞?
愿与你携手,沿河看柳
3楼2010-01-28 19:00:19
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gaozx123

金虫 (小有名气)

kikicocofiggo(金币+1): 2010-01-28 20:58
kikicocofiggo(金币+1): 2010-03-10 13:58
应该是消化过了,在多少温度环境下消化的呀,我一般室温下2分钟,如果放培养箱的话1分钟就OK了。
4楼2010-01-28 20:46:22
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kikicocofiggo

金虫 (小有名气)

我觉得这不是很可能的啊,我做过的细胞一般都可以消化个10分钟都没有问题的,我倒是消化了十分钟,因为我觉得消化不了,所以用了那么长时间,我在显微镜下看都细胞都没有缩起来,所以消化时间长了。照你们的说话,现在的细胞岂不是不能要了,重新培养为好了?
人生如戏,戏如人生
5楼2010-01-28 21:00:55
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yang0071

木虫 (职业作家)

kikicocofiggo(金币+3): 2010-03-10 13:58
kikicocofiggo(金币+1): 2010-03-23 22:24
引用回帖:
Originally posted by kikicocofiggo at 2010-01-28 22:00:55:
我觉得这不是很可能的啊,我做过的细胞一般都可以消化个10分钟都没有问题的,我倒是消化了十分钟,因为我觉得消化不了,所以用了那么长时间,我在显微镜下看都细胞都没有缩起来,所以消化时间长了。照你们的说话, ...

消化10分钟没问题? 你的胰酶浓度是多少?0.25%基本上1-2分钟足够了
镜下细胞没有缩倒是很奇怪,那么就是胰酶过期了可能,然后你强行吹打细胞,细胞破裂
6楼2010-01-29 07:35:55
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