查看: 1031  |  回复: 20
当前主题已经存档。

李彦辉

铜虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-01-28 12:38:49:
另外再给你个小建议,你刚开始做,体系大一点,感觉稍微稳定了,把体系降低到10ul,如果10ul体系你做的很稳定,每次跑都一样,那恭喜你,PCR培训成功。

这是个办法
11楼2010-01-28 12:45:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bigbangrex

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by hutingting at 2010-01-28 12:44:05:

不一定是你PCR做的有问题,有可能是跑胶的时候出来问题,看看配胶过程

那请问配胶过程中什么因素会导致实验不成功呢?
12楼2010-01-29 09:47:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bigbangrex

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-01-28 12:38:49:
另外再给你个小建议,你刚开始做,体系大一点,感觉稍微稳定了,把体系降低到10ul,如果10ul体系你做的很稳定,每次跑都一样,那恭喜你,PCR培训成功。

请问大体系是指50ul 左右的吗?
13楼2010-01-29 09:50:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nankou2008

铁杆木虫 (著名写手)

肥南瓜


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
50ul体系很大了, 25,20的试试就行了
另外配完反应体系  轻微离心混匀下
湖深而静溪浅而鸣
14楼2010-01-29 10:22:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guanni1011

铁虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你用的模板是一样的吗?
15楼2010-02-04 11:15:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bigbangrex

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by guanni1011 at 2010-02-04 11:15:19:
你用的模板是一样的吗?

一摸一样的引物
16楼2010-02-07 19:59:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skkyy88888

铜虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
多做吧.这个是靠手法的.
17楼2010-02-08 10:08:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cyjwx123

铁虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
司马诸葛(金币+1): 2010-03-04 20:37
每次都是这样的结果吗?还是偶尔一次?我觉得要检查自己是否哪个环节出错就是做一个平行实验,如果结果和上次一样的话,那么就把Mg2+,dNTP,还有Buffer都换下,最好酶也重新换下再做一次看,注意各个东西加入的顺序,一般是这样的顺序:先ddw,再加Taq酶的Buffer,再加入dNTP,forward-primer和reverse-primer,最后要迅速的加入Taq酶。体系配好之后要速度进行PCR扩增。
看的开才是真本事~
18楼2010-02-08 13:53:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

松上云雀

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
极有可能是你加完体系后没有混匀,最好是加完体系短暂离心一下。再试一次看看吧。
19楼2010-02-08 14:24:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yunwalking

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 雨中蜗牛 at 2010-01-27 21:31:04:
有可能你的模板没加够量,也有可能是酶没加上,一回生二回熟,多做就好了

"酶没加上“会有引物二聚体?  也是新手吧?
爱我中华~
20楼2010-02-09 11:14:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 bigbangrex 的主题更新
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见