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yangym1123木虫 (小有名气)
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[交流]
【求助/交流】克隆出现的奇怪问题,请教各位大虾!
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| 最近有个同学做克隆时出现下面的问题:用LATaq酶进行PCR扩增得到一条2.0K左右的条带,连接进入pMD18-TVector,挑取单克隆进行菌落PCR验证(普通Taq酶),验证只有100多bp左右的条带,用LATaq酶进行验证得到目的条带和一条100 多bp条带,提取质粒后酶切也得到了目的条带2.0K左右的带(看到目的条带和载体带),送菌液测序,测序结果非常奇怪,测出来是100多bp的条带,为什么酶切验证过有目的条带2.0的片段,测序却测出来是100多bp呢?请教各位大虾,谢谢啦! |
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rfxu
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