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麒麟8869

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助】液相色谱条件的确定?

接到一个分析项目,如何开展液相色谱条件的选择,帮忙!

[ Last edited by happy169 on 2010-1-27 at 09:14 ]
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草莓8398

新虫 (小有名气)


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液相色谱要优化的条件包括:色谱柱的选择(正相或反相)、流动相(组成、比例、酸度)、泵流速、柱温及紫外检测波长等。
2楼2010-01-27 11:24:25
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sincerejhy

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
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佳怡(金币+3):3Q· 1-27 18:52
先查是否有你做项目的质量标准,如果有就按质量标准条件来做,如果没有标准可以查找你的项目类似结构及性质的质量标准,以它的色谱条件为起点开始进行流动相的比例、pH值;色谱柱的选择(C8、C18、-CN柱、-NH2柱、苯基柱及长柱或短柱),其他的可筛选的流速、柱温等影响不是很大。
笃信,朴实无华,最真最美!
3楼2010-01-27 11:39:20
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luomuwuhen

金虫 (著名写手)


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简单
1.选择柱子,基本上先用C18柱试
2.液相用UV检测器的话,做一下目标物的全波长紫外扫瞄,确定选择波长。
3.调节流动相条件,基本上先用甲醇或者乙腈冲柱子,看看大体上的峰形和保留情况。然后根据需要减小有机相比例,使分离度较好。如果可以梯度的话,20min内10%-100%的有机相梯度,了解下目标物的大致极性。
4.优化分离度,如果分离较差,或者峰形不好,就需要把水相换成缓冲液了。有时适当调节下PH也是很有必要的。
药物合成
4楼2010-01-27 12:11:31
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luomuwuhen

金虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★
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佳怡(金币+4):3Q~ 1-27 18:51
1.选择柱子,基本上先用C18柱试
2.液相用UV检测器的话,做一下目标物的全波长紫外扫瞄,确定选择波长。
3.调节流动相条件,基本上先用甲醇或者乙腈冲柱子,看看大体上的峰形和保留情况。然后根据需要减小有机相比例,使分离度较好。如果可以梯度的话,20min内10%-100%的有机相梯度,了解下目标物的大致极性。
4.优化分离度,如果分离较差,或者峰形不好,就需要把水相换成缓冲液了。有时适当调节下PH也是很有必要的。
药物合成
5楼2010-01-27 12:20:36
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cecillia6887

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
佳怡(金币+0):这样的问题可以私下交流~不要回复类似的内容,版块还是注重学术交流 1-27 18:51
请站内PM楼主~

[ Last edited by 佳怡 on 2010-1-27 at 18:52 ]
6楼2010-01-27 15:10:39
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