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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】液相色谱条件的确定？
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麒麟8869

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助】液相色谱条件的确定？

接到一个分析项目，如何开展液相色谱条件的选择，帮忙！

[ Last edited by happy169 on 2010-1-27 at 09:14 ]
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1楼 2010-01-26 21:48:55
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草莓8398

新虫 (小有名气)
★
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液相色谱要优化的条件包括：色谱柱的选择（正相或反相）、流动相（组成、比例、酸度）、泵流速、柱温及紫外检测波长等。
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2楼2010-01-27 11:24:25
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sincerejhy

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
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佳怡(金币+3):3Q· 1-27 18:52
先查是否有你做项目的质量标准，如果有就按质量标准条件来做，如果没有标准可以查找你的项目类似结构及性质的质量标准，以它的色谱条件为起点开始进行流动相的比例、pH值；色谱柱的选择（C8、C18、-CN柱、-NH2柱、苯基柱及长柱或短柱），其他的可筛选的流速、柱温等影响不是很大。
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笃信，朴实无华，最真最美！
3楼2010-01-27 11:39:20
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luomuwuhen

金虫 (著名写手)
★
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简单
1.选择柱子，基本上先用C18柱试
2.液相用UV检测器的话，做一下目标物的全波长紫外扫瞄，确定选择波长。
3.调节流动相条件，基本上先用甲醇或者乙腈冲柱子，看看大体上的峰形和保留情况。然后根据需要减小有机相比例，使分离度较好。如果可以梯度的话，20min内10%-100%的有机相梯度，了解下目标物的大致极性。
4.优化分离度，如果分离较差，或者峰形不好，就需要把水相换成缓冲液了。有时适当调节下PH也是很有必要的。
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药物合成
4楼2010-01-27 12:11:31
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luomuwuhen

金虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★
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佳怡(金币+4):3Q~ 1-27 18:51
1.选择柱子，基本上先用C18柱试
2.液相用UV检测器的话，做一下目标物的全波长紫外扫瞄，确定选择波长。
3.调节流动相条件，基本上先用甲醇或者乙腈冲柱子，看看大体上的峰形和保留情况。然后根据需要减小有机相比例，使分离度较好。如果可以梯度的话，20min内10%-100%的有机相梯度，了解下目标物的大致极性。
4.优化分离度，如果分离较差，或者峰形不好，就需要把水相换成缓冲液了。有时适当调节下PH也是很有必要的。
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药物合成
5楼2010-01-27 12:20:36
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cecillia6887

金虫 (小有名气)
★
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佳怡(金币+0):这样的问题可以私下交流~不要回复类似的内容，版块还是注重学术交流 1-27 18:51
请站内PM楼主~

[ Last edited by 佳怡 on 2010-1-27 at 18:52 ]
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6楼2010-01-27 15:10:39
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