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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于考马斯亮蓝法测定蛋白含量的问题
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catherine_

木虫 (正式写手)
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引用回帖:
Originally posted by 植物教主 at 2010-10-14 20:47:18:



那如果我想知道pH对某浸出液的蛋白含量的影响，我用酸碱调了从2-12的6个pH值，是否我的空白也要用水代替浸出液，然后调到对应的pH呢?

我觉得还是配两种空白比较好，一种就是蒸馏水，一种就是蒸馏水和那种浸出液的混合液体。
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11楼2010-10-15 08:52:48
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catherine_

木虫 (正式写手)
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引用回帖:
Originally posted by zmchail at 2010-01-27 12:19:09:
PH在正常范围内是不影响考染的，只有强的还原物质如DDT  CHAPS 等影响，一般染色剂与蛋白质在5分钟内达到稳定！参考1976年的一篇英文文献吧！

同学。。。现在你让我们看一篇1976年的文献。。。是不是旧了点。。。。我承认很多经典文献与年代无关，可你能不能有了切身体会之后再来说这个问题比较好？

不影响测定，不是说数值，颜色没有影响，是因为有背景平衡，把背景扣除之后，影响减弱了好不好。。。
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12楼2010-10-15 08:57:04
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植物教主

铁杆木虫 (著名写手)
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Originally posted by catherine_ at 2010-10-15 08:52:48:




我觉得还是配两种空白比较好，一种就是蒸馏水，一种就是蒸馏水和那种浸出液的混合液体。

为什么？不明白耶
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哦也也哦啦啦~
13楼2010-10-15 09:01:11
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qwk123

禁虫 (正式写手)
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lstt09nk:交流，求助帖请勿灌水~ 2010-10-15 11:21:23
本帖内容被屏蔽
14楼2010-10-15 10:19:13
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sdfcgb

新虫 (初入文坛)
是的
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15楼2012-11-24 13:18:15
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sdfcgb

新虫 (初入文坛)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
考察酸碱度用考马斯亮蓝测定蛋白 基本错误，即使你用相同ph做空白，因为考马斯亮蓝液必须保持酸性才稳定，也就是说样品的ph最好都是中性，因为你的标准曲线样品是中性的，最关键的是ph对考马斯亮蓝的显色影响很大，一偏碱就会变蓝色
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16楼2012-11-24 13:22:59
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田俊杰16

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我想请教一下为什么我用考马斯亮蓝G-250测可溶性蛋白时，做的标曲一个9都达不到啊
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17楼2013-04-20 09:11:02
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wyswu

铜虫 (小有名气)
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引用回帖:
17楼: Originally posted by 田俊杰16 at 2013-04-20 09:11:02
我想请教一下为什么我用考马斯亮蓝G-250测可溶性蛋白时，做的标曲一个9都达不到啊

有同感，看了这么多帖子，我觉得这个方法还需要再摸索一下，看能不能有所提升
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18楼2013-11-17 20:12:59
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斯人也

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也做不出标曲来，以前是做出来过的，
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19楼2020-01-13 21:33:57
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