24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 471  |  回复: 4
当前主题已经存档。

qianggene

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】植物转基因问题求助

给位虫友,我现在克隆到一个合成酶基因,由于总是拿不到5'端,所以缺失起始密码子,大概还差60个核苷酸就完整了,现在想做转基因,转烟草,听说可以转片段,而不需转全长,那小妹有个问题很困惑,如果转片段的话,转哪一段比较好,在选择片段的时候有什么原则吗?
谢谢各位虫友赐教!
可能是我说的不够具体,所以大家都没法给我解答,我再具体一下:我前段时间克隆一个基因,拿到这个基因的目的就是做转基因植株,本想拿到全长后再转,但总是做不出5'端,得不到起始密码子,所以我决定将现有的片段(大约1500bp左右)转入烟草,但怎么选择转哪一段,有没有什么原则,比如说选择功能保守区?还是随便选择一段编码区就可以?
希望我这样叙述后能让大家明白我的意思,帮我解答这个问题。小妹不胜感激!

[ Last edited by qianggene on 2010-1-26 at 09:30 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hhwang

木虫 (小有名气)

★ ★
qianggene(金币+1): 1-26 11:17
司马诸葛(金币+1): 1-26 11:20
你是要吊基因还是只是克隆
如果是吊基因,有时会出现你说的这个问题
如果是克隆,那就是你引物设计有问题
片断可以转,但是必须你知道这个片断能发挥功能
总之 我觉得你问题太泛,要具体点
2楼2010-01-25 23:11:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (著名写手)

本帖仅楼主可见
3楼2010-01-25 23:37:48
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

yujiaping1

木虫 (著名写手)

★ ★
qianggene(金币+1): 1-26 11:17
司马诸葛(金币+1): 1-26 11:20
一楼说的对,如果你想转片段,那么就必须是你转的片段可以发挥你想要的功能,从目前你差60多个氨基酸的情况看,我觉得转片段不是很可行,不过如果确实可以保证功能去能够行使功能,也可以试试。你先查一下你的基因功能域,然后看一下是否完整,如果完整可以考虑转片段,但是一般转片段都是把整个ORF转进去,所以你这样做希望其实很迷茫。这种情况还是建议你继续设计5‘RACE引物,将5’RACE跑出来,拿到全长,就万无一失了
4楼2010-01-26 09:44:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zjwang

木虫 (正式写手)

看你转基因的目的了,如果是看亚细胞定位,估计N端的一段就够了,如果是看功能最好是全长,或者是保守的功能域,问题是你没有N端,没有起始密码子,怎么启动你基因表达呢?
5楼2010-01-28 15:13:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 qianggene 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085500求调剂材料 +11 易11122 2026-04-09 11/550 2026-04-14 17:59 by lhj2009
[考研] 材料299专硕求调剂 +16 +21 2026-04-09 16/800 2026-04-14 17:06 by jiangguiquan11
[考研] 一志愿085502,267分求调剂 +19 再忙也要吃饭啊 2026-04-08 20/1000 2026-04-14 16:03 by zs92450
[考研] 调剂 +12 月@163.com 2026-04-11 12/600 2026-04-14 15:37 by zs92450
[考研] 284求调剂 +17 让我上岸吧阿西 2026-04-09 17/850 2026-04-14 14:44 by 不我拉绿卡
[考研] 生物学调剂 +7 纸扇zhishan 2026-04-13 7/350 2026-04-14 14:21 by jyl0317
[考研] 一志愿双非085400电子信息344 求调剂,对材料和化学方向也感兴趣 +12 无情的小羊 2026-04-09 13/650 2026-04-13 14:17 by 张zhihao
[考研] 290求调剂 +18 柯淮然 2026-04-12 20/1000 2026-04-13 12:56 by cyh—315
[考研] 322求调剂,08工科 +4 今天是个小号 2026-04-08 4/200 2026-04-13 00:20 by baobaoye
[硕博家园] 新一代电子信息294求调剂 不挑学校 +7 Ytyt11 2026-04-09 8/400 2026-04-12 16:57 by ajpv风雷
[考研] 求调剂,一志愿材料科学与工程985,365分, +8 材化李可 2026-04-11 10/500 2026-04-12 08:42 by 852137818
[考研] 调剂 +6 青灯不负 2026-04-09 6/300 2026-04-11 20:35 by dongdian1
[考研] 电子信息279求调剂,有书读就行 +8 wwwooden 2026-04-08 11/550 2026-04-11 20:22 by cq2548
[考研] 本科211 工科085400 280分求调剂 可跨专业 +11 LZH(等待调剂中 2026-04-10 11/550 2026-04-11 08:39 by zhq0425
[考研] 368求调剂 +3 17385968172 2026-04-10 3/150 2026-04-10 20:12 by 电子奥德彪
[考研] 0858求调剂 5+5 Gky09300550, 2026-04-10 8/400 2026-04-10 19:13 by chemisry
[考研] 一志愿京区985,085401电子信息,本科电子信息 +3 阳光开朗的男孩 2026-04-10 3/150 2026-04-10 16:29 by sophia_93
[考研] 349学科化学045106求调剂,化学类都可以 +8 保好懂懂 2026-04-08 8/400 2026-04-09 14:03 by xulei3024
[考研] 招收有机化学、化工,药学,食品灯专业学生 +3 yrfhjgdj 2026-04-08 3/150 2026-04-09 10:15 by QYQX_123
[考研] 软件工程求调剂22软工296分求调剂,接受跨调 +4 yangchen2017 2026-04-08 5/250 2026-04-08 21:56 by 土木硕士招生
信息提示
请填处理意见