24小时热门版块排行榜    

查看: 308  |  回复: 2
当前主题已经存档。

北极之光

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】重组表达蛋白如何定量

本人做实验中有一个困扰的问题,请各位大侠帮忙解答。
采用真核表达载体表达的一个重组蛋白,具有酶活性。
酶活性的测定可以不受杂蛋白影响,或者说影响不大。但是要做不同种类的重组蛋白的活性对比的时候,需要在同一个浓度下进行,这就需要对目的蛋白进行定量了。
请问:是否一定要对这种目的蛋白进行纯化之后才能进行定量?(由于用亲和吸附材料进行纯化的话有可能会改变蛋白的折叠从而影响活性,所以想问问)
该蛋白在构建载体的时候带了组氨酸标签。

请做过类似研究的同行们不吝赐教,有好的方法多多提醒。!不胜感激!
回复此楼
人在江湖,谁不三俗!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biogefart

木虫 (著名写手)

组氨酸标签影响酶活的概率很小,严谨的酶学研究必须用纯酶做!!
闹太套
2楼2010-01-22 14:16:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

北极之光

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by biogefart at 2010-1-22 14:16:
组氨酸标签影响酶活的概率很小,严谨的酶学研究必须用纯酶做!!

已经测定过细胞培养液的酶活性,很高。即未经纯化之前的活性还是很高的。
人在江湖,谁不三俗!
3楼2010-01-22 14:39:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 北极之光 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[考研] 303求调剂 +5 安忆灵 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:46 by 素颜倾城1988
[考研] 一志愿070300浙大化学358分,求调剂! +3 酥酥鱼.. 2026-03-21 3/150 2026-03-22 11:31 by 杨杨杨紫
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +10 枫桥ZL 2026-03-18 12/600 2026-03-21 22:02 by peike
[考研] 求助 +5 梦里的无言 2026-03-21 6/300 2026-03-21 17:51 by 学员8dgXkO
[考研] 278求调剂 +9 烟火先于春 2026-03-17 9/450 2026-03-21 17:47 by 学员8dgXkO
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +5 纸鱼ly 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:11 by 学员8dgXkO
[基金申请] 学校已经提交到NSFC,还能修改吗? 40+4 babangida 2026-03-19 9/450 2026-03-21 16:12 by babangida
[考研] 307求调剂 +3 wyyyqx 2026-03-17 3/150 2026-03-21 03:20 by JourneyLucky
[考研] 265求调剂 +9 梁梁校校 2026-03-17 9/450 2026-03-21 02:17 by JourneyLucky
[考研] 华东师范大学-071000生物学-293分-求调剂 +3 研究生何瑶明 2026-03-18 3/150 2026-03-21 01:30 by JourneyLucky
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 5/250 2026-03-20 22:11 by 云游重阳
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +5 tcxiaoxx 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:35 by laoshidan
[考研] 一志愿西南交通 专硕 材料355 本科双非 求调剂 +5 西南交通专材355 2026-03-19 5/250 2026-03-20 21:10 by JourneyLucky
[考研] 281求调剂(0805) +14 烟汐忆海 2026-03-16 25/1250 2026-03-20 15:47 by yuncha
[论文投稿] 申请回稿延期一个月,编辑同意了。但系统上的时间没变,给编辑又写邮件了,没回复 10+3 wangf9518 2026-03-17 4/200 2026-03-19 23:55 by babero
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
[考研] 328求调剂,英语六级551,有科研经历 +4 生物工程调剂 2026-03-16 12/600 2026-03-19 11:10 by 生物工程调剂
信息提示
请填处理意见