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足下客

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】请教如何测量计算质粒的转化效率

请教一下大家怎样测量和计算质粒的转化效率呀?请说一下具体的实验方法和计算方法。
转化效率与感受态细胞有关系,那岂不是不同的感受态细胞质粒的转化效率都不一样吗?
PS:此质粒是我自己构建的穿梭载体,感受态细胞因为没有商品化的,所以只能自己制备,用电转
谢谢大家!
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pengl001

木虫 (小有名气)

★ ★
1949stone(金币+2,VIP+0): 1-22 13:43
足下客(金币+1):谢谢 2010-03-15 12:12
  转化后在含抗生素的平板上长出的菌落即为转化子,根据此皿中的菌落数可计算出转化子总数和转化频率,公式如下:
  转化子总数=菌落数×稀释倍数×转化反应原液总体积/涂板菌液体积
  转化频率(转化子数/每mg质粒DNA)=转化子总数/质粒DNA加入量(mg)
  感受态细胞总数=对照组2菌落数×稀释倍数×菌液总体积/涂板菌液体积
  感受态细胞转化效率=转化子总数/感受态细胞总数
Yes,Ican!
2楼2010-01-22 12:43:12
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雪山飞狐7233

铁杆木虫 (著名写手)

铁杆小虫

足下客(金币+1):谢谢 2010-03-15 12:12
质粒小提试剂盒一般都有介绍!按照做就行了。
梦在路就在!
3楼2010-01-22 13:25:22
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