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足下客

木虫 (正式写手)

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专业: 临床分子生物学检验

[交流] 【求助/交流】请教如何测量计算质粒的转化效率

请教一下大家怎样测量和计算质粒的转化效率呀？请说一下具体的实验方法和计算方法。
转化效率与感受态细胞有关系，那岂不是不同的感受态细胞质粒的转化效率都不一样吗？
PS：此质粒是我自己构建的穿梭载体，感受态细胞因为没有商品化的，所以只能自己制备，用电转
谢谢大家！

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1楼 2010-01-22 10:28:42

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pengl001

木虫 (小有名气)

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1949stone(金币+2,VIP+0): 1-22 13:43
足下客(金币+1):谢谢 2010-03-15 12:12

　　转化后在含抗生素的平板上长出的菌落即为转化子，根据此皿中的菌落数可计算出转化子总数和转化频率，公式如下：
　　转化子总数＝菌落数×稀释倍数×转化反应原液总体积／涂板菌液体积
　　转化频率（转化子数／每mg质粒DNA）＝转化子总数／质粒DNA加入量(mg)
　　感受态细胞总数＝对照组２菌落数×稀释倍数×菌液总体积／涂板菌液体积
　　感受态细胞转化效率＝转化子总数／感受态细胞总数