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【求助】关于液相的问题
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| 我用的是安捷伦的1100液相色谱，这段时间发现分离能力降低，我已经排除柱子的原因，柱子没有问题。现在的问题是我已经把流动相中的有机相乙腈比例调到了5%，流速0.5ml/min，我认为这已经是液相分离的极限条件了，可是原先可以很容易分离的物质，现在却没有办法分离。是不是液相的系统出了问题呢？问了工程师，工程师让我测流动相流速以检查流路是否有堵，检查结果没有问题。请问大家是否有遇到同样问题。问题到底在哪里呢？ |
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wuheng167
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9楼2010-01-21 21:59:19
2楼2010-01-21 20:35:27
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clh8183(金币+5,VIP+0):谢谢哦 1-21 21:23
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你说的问题关键是没有办法分离。 最可能的原因就是柱子及泵的流速（包括比例阀）。 柱子你信誓旦旦没有问题，按下不说。 然后就是泵的问题，泵流速正确的话，应该泵头没有问题。然后就是比例阀，就是有机相那个通道是不是没有液体出来。你让100%的有机相冲个10min，然后用手感觉泵出来的液体是否是有机相？（是有机相的话会发凉）。或者平时你设定溶剂体积后，液相走一段时间，你是否发现有机相的体积于后来显示的体积出入较大？如果是，应该比例阀的问题。 楼上说样品问题，应该没有事情。原因：你信誓旦旦保证柱子没有问题，说明你拿这个柱子在别的液相上做过你的样品。这样证明你的样品和柱子都没有问题。 还有检测器，只要你检测器的流通池没有更换，比如换成大体积的，则一般不会影响分离效果，只是会影响响应灵敏度。检测器带宽设置只会影响一点点你的分离效果。 还有一个情况，就是你是不是管路（从进样器出来到进检测器前的管路）变粗，变长了？如果是，可能增加了死体积，峰形展宽了一些，不会太影响分离情况。除非你以前的峰就是恰好分离。 |
4楼2010-01-21 21:05:31
