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【求助】关于液相的问题
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| 我用的是安捷伦的1100液相色谱，这段时间发现分离能力降低，我已经排除柱子的原因，柱子没有问题。现在的问题是我已经把流动相中的有机相乙腈比例调到了5%，流速0.5ml/min，我认为这已经是液相分离的极限条件了，可是原先可以很容易分离的物质，现在却没有办法分离。是不是液相的系统出了问题呢？问了工程师，工程师让我测流动相流速以检查流路是否有堵，检查结果没有问题。请问大家是否有遇到同样问题。问题到底在哪里呢？ |
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2楼2010-01-21 20:35:27
3楼2010-01-21 20:57:23
mikeliubao
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clh8183(金币+5,VIP+0):谢谢哦 1-21 21:23
clh8183(金币+5,VIP+0):谢谢哦 1-21 21:23
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你说的问题关键是没有办法分离。 最可能的原因就是柱子及泵的流速（包括比例阀）。 柱子你信誓旦旦没有问题，按下不说。 然后就是泵的问题，泵流速正确的话，应该泵头没有问题。然后就是比例阀，就是有机相那个通道是不是没有液体出来。你让100%的有机相冲个10min，然后用手感觉泵出来的液体是否是有机相？（是有机相的话会发凉）。或者平时你设定溶剂体积后，液相走一段时间，你是否发现有机相的体积于后来显示的体积出入较大？如果是，应该比例阀的问题。 楼上说样品问题，应该没有事情。原因：你信誓旦旦保证柱子没有问题，说明你拿这个柱子在别的液相上做过你的样品。这样证明你的样品和柱子都没有问题。 还有检测器，只要你检测器的流通池没有更换，比如换成大体积的，则一般不会影响分离效果，只是会影响响应灵敏度。检测器带宽设置只会影响一点点你的分离效果。 还有一个情况，就是你是不是管路（从进样器出来到进检测器前的管路）变粗，变长了？如果是，可能增加了死体积，峰形展宽了一些，不会太影响分离情况。除非你以前的峰就是恰好分离。 |
4楼2010-01-21 21:05:31
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yensh(金币+2,VIP+0):回来分享心得 1-21 21:24
yensh(金币+2,VIP+0):回来分享心得 1-21 21:24
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哈哈！大家真热心！谢谢大家 首先：我的样品确实没有问题，这个我已经做过一个体系。 其次，我还想再反应一个问题就是，一般如果有机相比例很低，流速很慢的话，出峰时间会很慢，峰形会很胖，可是我的四种物质出峰时间在一分钟多，并且峰又高又尖，没有分开的趋势，如果我不说那是四种物质，看起来就是一种物质。 并且，我的检测器是没有问题的，因为我先接的DAD,后面是MS. 还有，我的四元泵，我怕是混合有问题，所以我尝试了先将有机相与水相混合，然后从有机相流路按100%走，可是依然没有改变。 至于柱子，我试了四根柱子，有3.0的，有4.6的，都是只出一个峰。 请大家再帮忙分析下哦 |
5楼2010-01-21 21:22:34
6楼2010-01-21 21:28:26
不会是你的进样器有问题吧？ 7楼2010-01-21 21:29:12
8楼2010-01-21 21:34:23
wuheng167
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9楼2010-01-21 21:59:19
gretea
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10楼2010-01-22 11:02:05