24小时热门版块排行榜    

查看: 571  |  回复: 4
当前主题已经存档。

jessenju

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】求教DNA测序技术鉴定细菌种类

求教DNA测序技术,主要包括以下几个步骤吗
1) 细菌DNA提取,PCR扩增,跑胶分离,DNA测序和基因库对比吗?
2)请问整个过程要在Biosafety Level 2的实验室进行吗,还是普通实验室就可以,能介绍下主要的器材吗?
3)DNA测序是送到公司去做的,那送过去的样品应该是什么形式的,跑完胶之后怎么处理样品;
4)DNA测序后拿到的结果是什么样子的,基因库从哪儿找阿;
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanbo934

至尊木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★
jessenju(金币+2,VIP+0):谢谢,我没有做过这个实验,能问问这个实验成功率怎么样?有什么关键步骤 要注意的吗? 1-20 12:29
1949stone(金币+2,VIP+0): 1-20 15:40
1) 扩16S后,测完序后在NCBI比对
2)普通实验室就可以,需要超净台,离心机,水浴锅,PCR仪,凝胶成像系统,电泳仪等
3)有两种形式,一割胶直接测序即PCR产物,二把割胶后连接转化进入大肠杆菌中测序
4)拿到的是核算序列,然后在NCBI中的BLAST中比对。
2楼2010-01-20 11:35:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanbo934

至尊木虫 (著名写手)

很传统,注意PCR时要有阴性和阳性对照,阴性用配溶液的水.(即提DNA回溶的水,不用TE回溶因为用水PCR更容易做出来),模板DNA可以稀释到一定浓度作PCR.
3楼2010-02-02 14:17:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jasco

木虫 (正式写手)

16s rDNA菌种鉴定,通用引物pcr,产物测序即可,普通分子生物学实验室就行了
4楼2010-02-02 14:33:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

85715623

木虫 (正式写手)

jessenju(金币+2): 2010-02-02 15:41
《分子克隆试验指南》上有详细介绍,请参考。
5楼2010-02-02 15:08:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jessenju 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +3 工厂打螺丝 2026-08-08 3/150 2026-08-11 13:42 by 会议编辑
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] FileCode能看出啥? +7 要乐观耀哥 2026-08-10 17/850 2026-08-11 10:50 by 要乐观耀哥
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +5 布布和一二 2026-08-10 6/300 2026-08-11 10:15 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +9 documentary 2026-08-10 9/450 2026-08-11 10:08 by wk7465
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +15 Lanmanbaby 2026-08-09 23/1150 2026-08-11 09:51 by demonstreets
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
信息提示
请填处理意见