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lsm9110

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】HPLC色谱峰问题

请教各位高手:
   有一主要含皂苷的中药,在梯度洗脱时(在乙腈:水:50:50左右时,柱子,C18,4.6*200)出现的峰很高,但是直接用等度洗脱时(乙腈:水:48:52),峰却拉宽了变得很矮了。柱子没有换,流动相的极性我想也没差多少哈,不知道这是什么原因?(文献有报道的测此处两个成分含量,也用C18柱,4.6*150,用乙腈:水:42:58,感觉峰还可以哈) 谢谢啦
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yxh1875

银虫 (正式写手)


lsm9110(金币+1): 1-26 21:31
梯度是比等度的分离度、峰形、理论塔板数等都要高。
5楼2010-01-20 19:18:55
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doraemon3280

金虫 (正式写手)


lsm9110(金币+1): 1-26 21:30
梯度出的峰是会比等度的峰形好 峰面积呢一样么?流动相的改变会影响的 也可能是柱效低导致和文献的峰形不一样
白羊座的天空
2楼2010-01-20 08:48:09
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lovefred

银虫 (正式写手)

★ ★
karl2100(金币+1,VIP+0):3Q 1-20 22:52
lsm9110(金币+1): 1-26 21:30
梯度洗脱时的峰确实比等度时峰形好,塔板数好。。要是有对照品的话,外标法看下含量吧。。要是怀疑有其他峰的话,用PDA看下峰纯度好了。。
3楼2010-01-20 10:48:33
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luomuwuhen

金虫 (著名写手)

★ ★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教! 1-20 22:52
lsm9110(金币+1): 1-26 21:31
梯度的峰一般都是很尖锐的,用等度如果洗脱较晚的话(一般1.0ml流速,30分钟后)峰自然就会很宽了,看一下两者的峰面积差不多就可以了。另外,含有两种组分的可能性也有,如果两者极性很接近的话
药物合成
4楼2010-01-20 12:04:29
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