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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 【求助】HPLC色谱峰问题
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lsm9110

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】HPLC色谱峰问题

请教各位高手：
   有一主要含皂苷的中药，在梯度洗脱时（在乙腈：水：50：50左右时，柱子，C18，4.6*200）出现的峰很高，但是直接用等度洗脱时（乙腈：水：48：52），峰却拉宽了变得很矮了。柱子没有换，流动相的极性我想也没差多少哈，不知道这是什么原因？（文献有报道的测此处两个成分含量，也用C18柱，4.6*150，用乙腈：水：42：58，感觉峰还可以哈） 谢谢啦
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1楼 2010-01-19 22:11:36
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doraemon3280

金虫 (正式写手)
★
lsm9110(金币+1): 1-26 21:30
梯度出的峰是会比等度的峰形好 峰面积呢一样么？流动相的改变会影响的 也可能是柱效低导致和文献的峰形不一样
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白羊座的天空
2楼2010-01-20 08:48:09
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lovefred

银虫 (正式写手)
★ ★
karl2100(金币+1,VIP+0):3Q 1-20 22:52
lsm9110(金币+1): 1-26 21:30
梯度洗脱时的峰确实比等度时峰形好，塔板数好。。要是有对照品的话，外标法看下含量吧。。要是怀疑有其他峰的话，用PDA看下峰纯度好了。。
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3楼2010-01-20 10:48:33
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luomuwuhen

金虫 (著名写手)
★ ★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！ 1-20 22:52
lsm9110(金币+1): 1-26 21:31
梯度的峰一般都是很尖锐的，用等度如果洗脱较晚的话（一般1.0ml流速，30分钟后）峰自然就会很宽了，看一下两者的峰面积差不多就可以了。另外，含有两种组分的可能性也有，如果两者极性很接近的话
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药物合成
4楼2010-01-20 12:04:29
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yxh1875

银虫 (正式写手)
★
lsm9110(金币+1): 1-26 21:31
梯度是比等度的分离度、峰形、理论塔板数等都要高。
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5楼2010-01-20 19:18:55
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glint

★
lsm9110(金币+1): 1-26 21:31
如果楼主确定梯度洗脱和等度洗脱，得到的峰都是单一纯度的峰，那么建议你看看色谱模型理论，速率理论。
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6楼2010-01-21 12:51:13
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