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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 【讨论】关于多糖的分离问题
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main128

木虫 (正式写手)

[交流] 【讨论】关于多糖的分离问题

我希望分离出不同分子量大小的直链均一多糖，我目前使用的方法是sephadex葡聚糖凝胶分离,但是发现分不开，除了选用的凝胶不合适外还有其他的原因吗？

再请教各位，直链的均一多糖还可以用哪些方法分离？
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1楼 2010-01-18 19:05:29
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yaodeyaode

木虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★ ★
main128(金币+5,VIP+0): 1-19 14:53
引用回帖:
Originally posted by main128 at 2010-1-19 01:40:



但又有一个疑问，检测器改选那种？
我选了示差折光检测器，不能用梯度的。

在初步分离时，不用检测器（示差折光检测器都不用），直接按我建议的分离，然后用分部收集器收集，再对每管用苯酚-硫酸法测多糖含量（上样前必须透析，除小分子，并脱蛋白），收集主要的组份，然后再上HPLC检测纯度。

其实有这样很多的文献，去中国期刊网下载一些类似的文章或硕博士论文，其中有详细的方法。
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9楼2010-01-19 07:12:51
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lai.scut

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★
hawkyin(金币+1,VIP+0):谢谢回帖交流！ 1-18 20:54
main128(金币+5,VIP+0): 1-18 21:23
除了凝胶的选择问题，还有可能是洗脱速度的问题，如果太快了，也可能分不开
其他方法的话，膜分离可以试试
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2楼2010-01-18 19:27:19
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main128

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by lai.scut at 2010-1-18 19:27:
除了凝胶的选择问题，还有可能是洗脱速度的问题，如果太快了，也可能分不开
其他方法的话，膜分离可以试试

再请问流速一般设为多大呢？
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3楼2010-01-18 21:25:01
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yaodeyaode

木虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★ ★
main128(金币+5,VIP+0): 1-19 01:38
引用回帖:
Originally posted by main128 at 2010-1-18 19:05:
我希望分离出不同分子量大小的直链均一多糖，我目前使用的方法是sephadex葡聚糖凝胶分离,但是发现分不开，除了选用的凝胶不合适外还有其他的原因吗？

再请教各位，直链的均一多糖还可以用哪些方法分离？

————————————————
先用DEAE柱分离，洗脱液应用H2O、0.05、0.10、0.20、0.5 mol/L 的NaCl 溶液进行梯度洗脱；然后未分开的组份再用Superdex  凝胶柱，用0.10 M NaCl 溶液进行分离，效果较好
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4楼2010-01-18 22:02:53
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