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独钓韩江雪

金虫 (正式写手)

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[交流] 柱色谱的问题

各位高手：
本人目前在用层析柱分离有机化合物。装柱子步骤是这样的：脱脂棉，石英砂，中性氧化铝，石英砂，洗脱机用的95%的乙醇。步骤都是按照实验书上做的，但是我把我的样品滴下去，没有任何现象。我不知道是怎么回事。
我的样品是无色的，我看过百度的视频，人家用的样品是有色的，是不是没有颜色的样品不能用层析柱分离呢？
希望大家给点意见和建议。谢谢！

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1楼 2010-01-16 21:09:24

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lsh163.4

金虫 (小有名气)

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★ ★ ★
独钓韩江雪(金币+3,VIP+0): 1-18 21:09

虽然大家也说了很多，但是我的建议还是重新查一下。95%乙醇你说是完全照书上做的，但是根据我过柱子的经验是这样的：1.有机物通常用正向柱进行分离（正向硅胶）淋洗剂通常石油醚：乙酸乙酯，至于比例，正如一位虫友所言，需要点板、爬板（石油醚：乙酸乙酯=3：1展开）确定；2.反相柱（大孔树脂）主要是较为亲水性物质（比如氨基酸等等），反相硅胶添柱，淋洗剂为水：甲醇，比较麻烦，需要梯度。我这么写有的简单，希望你可以看懂。很多细致的东西我不知道应该怎么写，而且操作性很强，理论只是一方面，建议找到真人（周围的同学又做指经常过柱子）好好学习。因为我们实验室就是专门搞柱层析分离的，所以，我不知道我说的，你能懂多少！