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独钓韩江雪

金虫 (正式写手)

[交流] 柱色谱的问题

各位高手:
    本人目前在用层析柱分离有机化合物。装柱子步骤是这样的:脱脂棉,石英砂,中性氧化铝,石英砂,洗脱机用的95%的乙醇。步骤都是按照实验书上做的,但是我把我的样品滴下去,没有任何现象。我不知道是怎么回事。
    我的样品是无色的,我看过百度的视频,人家用的样品是有色的,是不是没有颜色的样品不能用层析柱分离呢?
    希望大家给点意见和建议。谢谢!
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lsh163.4

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
独钓韩江雪(金币+3,VIP+0): 1-18 21:09
虽然大家也说了很多,但是我的建议还是重新查一下。95%乙醇你说是完全照书上做的,但是根据我过柱子的经验是这样的:1.有机物    通常用正向柱进行分离(正向硅胶)淋洗剂通常石油醚:乙酸乙酯,至于比例,正如一位虫友所言,需要点板、爬板(石油醚:乙酸乙酯=3:1展开)确定;2.反相柱 (大孔树脂)主要是较为亲水性物质(比如氨基酸等等),反相硅胶添柱,淋洗剂为水:甲醇,比较麻烦,需要梯度。我这么写有的简单,希望你可以看懂。很多细致的东西我不知道应该怎么写,而且操作性很强,理论只是一方面,建议找到真人(周围的同学又做指经常过柱子)好好学习。因为我们实验室就是专门搞柱层析分离的,所以,我不知道我说的,你能懂多少!
17楼2010-01-18 16:14:43
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lsh163.4

金虫 (小有名气)

虽然大家也说了很多,但是我的建议还是重新查一下。95%乙醇你说是完全照书上做的,但是根据我过柱子的经验是这样的:1.有机物    通常用正向柱进行分离(正向硅胶)淋洗剂通常石油醚:乙酸乙酯,至于比例,正如一位虫友所言,需要点板、爬板(石油醚:乙酸乙酯=3:1展开)确定;2.反相柱 (大孔树脂)主要是较为亲水性物质(比如氨基酸等等),反相硅胶添柱,淋洗剂为水:甲醇,比较麻烦,需要梯度。我这么写有的简单,希望你可以看懂。很多细致的东西我不知道应该怎么写,而且操作性很强,理论只是一方面,建议找到真人(周围的同学又做指经常过柱子)好好学习。因为我们实验室就是专门搞柱层析分离的,所以,我不知道我说的,你能懂多少!
18楼2010-01-18 16:15:15
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lsh163.4

金虫 (小有名气)

产品分离的量主要是可以根据柱子的直径大小决定的。
19楼2010-01-18 16:17:54
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lsh163.4

金虫 (小有名气)

不好意思,没看完。是这样的,实验室很少分离这么大的量,这么多的量用柱层析还是很困难一次分完的。建议重结晶或其他可行方案,过柱子有点.......
20楼2010-01-18 16:23:26
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