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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR不稳定。。。
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thinka

铜虫 (著名写手)
★
雨后郁金香(金币+1,VIP+0): 1-18 08:08
质粒模板应该万无一失才对,我想你是不是加了很多模板啊,如果到了百NG级会有这种情况，因该把模板控制在ng级
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21楼2010-01-17 10:37:11
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雨后郁金香

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by thinka at 2010-1-17 10:37:
质粒模板应该万无一失才对,我想你是不是加了很多模板啊,如果到了百NG级会有这种情况，因该把模板控制在ng级

我觉得也可能是模板的问题，之前是手提的质粒，然后稀释个50倍就去做了，没有去测它的浓度，今天我打算用试剂盒提下质粒，看看结果会不会有什么变化。。。。P质粒第一次遇到这种情况，而且有P出来的条带都不亮，搞得我都不确定是不是我的PCR产物了。。。。
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22楼2010-01-18 08:11:37
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yxx41

金虫 (小有名气)
每台仪器放4管——是不是意味着你用两台PCR？如果是的话，用一台吧，两台的温度肯定不一样
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内事不决问百度，外事不决问Google，横批：wikipedia
23楼2010-01-18 10:51:38
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zxy7576

新虫 (小有名气)
我也遇到了这种情况，正困扰中，我是一次有东西，一次没东西，都重复五次了，随机性很强，很郁闷，可能跟手法也有关系的吧~我每次都是手工热启后再加酶，但是每次加酶可能手法都不一样，所以导致结果不理想……跟楼主共勉~
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不论什么时候，什么处境，都不要忘记自己最初的梦想！
24楼2010-01-29 21:40:01
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mayerpaco

铁虫 (小有名气)
个人认为你摸条件时只做了一管是不是有点少了？
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25楼2010-02-02 15:53:22
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yinzhiminghao

铁杆木虫 (职业作家)
帮你顶一下
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人生得意须尽欢，莫使金樽空对月。
26楼2010-02-02 17:48:38
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