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jinlicong

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】微生物生长条件优化方面问题

液体培养基培养微生物菌种,想通过改变PH值、摇床转速、接种量等方式确定一个最佳培养条件。
目前发现摇床转速(100 120 140 160 180 200 220)越高,所测菌种OD值曲线也越高,都没见个平缓趋势。这样实在不知道该如何选取转速
而接种量上(1% 5% 10% 15% 20% 25%),都已经做到25%了,24小时培养后测定的OD值也是一直往上升……貌似没有尽头的样子。
我看一些人的研究,都会有个范围(先升,然后平缓,最后开始降),我这个都找不到范围了……所以不知该如何确定
希望得到相关经验的朋友的指导,谢谢!

另外就是测OD值的问题,我发现误差还是挺大的~~~不晓得你们在做某个参数对菌种生长影响的时候是用什么方式论定的?

[ Last edited by jinlicong on 2010-1-15 at 15:38 ]
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tjkdcl

铁杆木虫 (著名写手)

OD值应当稀释到02.-0.8之间,否则误差会很大
有志者事竟成!
8楼2010-02-03 14:20:40
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

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司马诸葛(金币+1,VIP+0): 1-15 19:25
一般来说都是固定转速,固定的接种量,然后随着时间不同做OD值的测定的啊~
不知道楼主做的是什么东东?
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2010-01-15 15:47:32
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xiaowangv1

金虫 (小有名气)

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司马诸葛(金币+2,VIP+0): 1-15 19:25
做发酵条件优化要先大范围优化再小范围优化。比如转速可以先做100,200,300,400.......(必须查文献根据菌的情况定),再从小范围内优化。
OD值检测最好用一台机器、一个人做、范围稀释到OD值在0.2-0.8为宜,必须做发酵培养基为空白对照。
以上建议仅供参考,希望对你有些帮助。
3楼2010-01-15 15:55:35
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guoenwen

金虫 (小有名气)

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司马诸葛(金币+1,VIP+0): 1-15 19:25
我们培养大肠杆菌,摇床转速是180rpm/min,三角瓶是2L,装800ml LB培养基。接种量在0.5%-1%,发酵接种量5%-10%.培养温度是37℃。
4楼2010-01-15 16:08:10
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