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汕头大学海洋科学接受调剂
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eagle_edu

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】请问 C18反相柱能用于培养基组分的测定吗?

我现在想要测一下以蔗糖为碳源的培养基发酵前后组分的变化,看看生成什么代谢产物,想用高效液相色谱做一下,以前没用过HPLC,实验员说是用C18反相柱,平时测药物的,请教各位,这个色谱柱可以用吗?
关于HPLC的分析软件都用什么?
非常感谢!
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wwyy0818

新虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+5,VIP+0): 1-15 11:46
可以使用的。 另外,HPLC的分析软件都是色谱系统自带的,很贵的哦
你要做这个实验,要做三个分析:
1.走一针作为对照的培养基
2.走一针发酵之后的培养基
3.对比两次HPLC的图谱,看看哪个(些)峰显著增高?注意1,2两次实验的上样量要一样而且系统条件要一样。
最后,如果上述比对结果为positive,就只能你自己来确认这个代谢产物是什么了
2楼2010-01-15 11:19:31
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eagle_edu

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by wwyy0818 at 2010-1-15 11:19:
可以使用的。 另外,HPLC的分析软件都是色谱系统自带的,很贵的哦
你要做这个实验,要做三个分析:
1.走一针作为对照的培养基
2.走一针发酵之后的培养基
3.对比两次HPLC的图谱,看看哪个(些)峰显著增高?注 ...

谢谢!还有一个问题,就是测样之前培养基应该怎样预处理?例如离心 过滤除菌什么的?
3楼2010-01-15 11:27:54
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wwyy0818

新虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by eagle_edu at 2010-1-15 11:27:



谢谢!还有一个问题,就是测样之前培养基应该怎样预处理?例如离心 过滤除菌什么的?

用0.25um的膜过滤,或在12000g下离心20min
4楼2010-01-15 11:32:37
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wwyy0818

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by wwyy0818 at 2010-1-15 11:32:

用0.25um的膜过滤,或在12000g下离心20min

还有,你的样品中不能含有大分子量的蛋白(10KD以上),要不可能会堵塞柱子
5楼2010-01-15 11:33:53
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