24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 482  |  回复: 5
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

liujichao

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】PCR产物的克隆

PCR产物的克隆:
      有人做过PCR产物的克隆吗?我的PCR产物为105bp,测序的结果不好,想做个克隆再进行。请问要购买试剂盒的话,应该怎么样选择?谢谢!急需!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liujichao

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by tianpingpe at 2010-1-14 13:21:
1.买一个ta克隆的载体,如pMD19-T或者是Pmd-18t接可以,很多公司都有卖ta克隆载体的
2.做pcr的时候可以先用pfu酶保证扩增的正确,然后加入taq酶,72° 20min,在pcr产物上加上a,就可以做连接了
3。将连接产物转 ...

要是买个试剂盒那?T/A试剂盒就行吗?
3楼2010-01-14 13:27:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

tianpingpe

新虫 (小有名气)

★ ★ ★
1949stone(金币+2,VIP+0): 1-14 17:50
liujichao(金币+1,VIP+0): 1-15 09:27
1.买一个ta克隆的载体,如pMD19-T或者是Pmd-18t接可以,很多公司都有卖ta克隆载体的
2.做pcr的时候可以先用pfu酶保证扩增的正确,然后加入taq酶,72° 20min,在pcr产物上加上a,就可以做连接了
3。将连接产物转入克隆载体,验证正确的就可以送去测序
2楼2010-01-14 13:21:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雪山飞狐7233

铁杆木虫 (著名写手)

铁杆小虫

★ ★ ★
1949stone(金币+2,VIP+0): 1-14 17:50
liujichao(金币+1,VIP+0): 1-15 09:27
国外有pcr产物回收试剂盒,专门回收200bp以下的产物。然后做TA克隆进行测序。
梦在路就在!
4楼2010-01-14 14:54:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿211,0703化学305分求调剂 +26 严西西戏 2026-04-06 33/1650 2026-04-11 23:01 by 314126402
[考研] 0854调剂 +11 长弓傲 2026-04-09 12/600 2026-04-11 11:16 by zhq0425
[考研] 298求调剂 +5 残荷新柳 2026-04-07 5/250 2026-04-11 11:02 by 紫曦紫棋
[考研] 300分求调剂 (085501机械专硕,本科扬大) +8 xu@841019 2026-04-11 8/400 2026-04-11 10:46 by qingpingzhu
[考研] 材料工程085601,270求调剂 +30 @ASDF1234 2026-04-08 32/1600 2026-04-11 10:30 by Delta2012
[考研] 293求调剂 +6 勇远库爱314 2026-04-08 6/300 2026-04-11 10:08 by zhq0425
[考研] 材料与化工调剂 +12 否极泰来2026 2026-04-10 13/650 2026-04-11 00:28 by wangjihu
[考研] 302分求调剂 +9 凡语祈愿 2026-04-08 10/500 2026-04-10 23:26 by 314126402
[考研] 一志愿0703化学招61最终排名62化学求调剂 +24 招61排名62 2026-04-07 28/1400 2026-04-10 16:15 by yx54321
[考研] 336材料与化工085600求调剂 +21 水星记infp 2026-04-05 24/1200 2026-04-10 15:28 by luoyongfeng
[考研] 一志愿中国科学院上海有机所,有机化学356分找调剂 +11 Nadiums 2026-04-09 11/550 2026-04-09 18:04 by lijunpoly
[考研] 材料299专硕求调剂 +10 +21 2026-04-09 10/500 2026-04-09 17:34 by 1753564080
[考研] 327求调剂 +10 Xxjc1107. 2026-04-06 11/550 2026-04-09 01:21 by lature00
[考研] 一志愿华南师范大学0702物理学305调剂 +4 念常安 2026-04-07 6/300 2026-04-08 22:53 by bljnqdcc
[考研] 考研求调剂 +4 雯??? 2026-04-08 4/200 2026-04-08 21:44 by 土木硕士招生
[考研] 电子信息346 +4 zuoshaodian 2026-04-08 4/200 2026-04-08 11:54 by zzucheup
[考研] 生物学363调剂求助 +7 fanzhang6666 2026-04-06 9/450 2026-04-07 17:37 by lijunpoly
[考研] 求调剂到材料 +5 程9915 2026-04-06 5/250 2026-04-06 15:21 by yulian1987
[考研] 第一志愿东南大学物理313,有科研竞赛获奖经历,希望物理复试调剂 +3 马内橙 2026-04-05 3/150 2026-04-06 10:32 by 蓝云思雨
[考研] 324求调剂 +3 k可乐 2026-04-05 4/200 2026-04-06 09:54 by 蓝云思雨
信息提示
请填处理意见