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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR产物的克隆
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liujichao

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】PCR产物的克隆

PCR产物的克隆：
      有人做过PCR产物的克隆吗？我的PCR产物为105bp,测序的结果不好，想做个克隆再进行。请问要购买试剂盒的话，应该怎么样选择？谢谢！急需！！
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1楼 2010-01-14 12:17:47
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tianpingpe

新虫 (小有名气)
★ ★ ★
1949stone(金币+2,VIP+0): 1-14 17:50
liujichao(金币+1,VIP+0): 1-15 09:27
1.买一个ta克隆的载体，如pMD19-T或者是Pmd-18t接可以，很多公司都有卖ta克隆载体的
2.做pcr的时候可以先用pfu酶保证扩增的正确，然后加入taq酶，72° 20min，在pcr产物上加上a，就可以做连接了
3。将连接产物转入克隆载体，验证正确的就可以送去测序
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2楼2010-01-14 13:21:11
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liujichao

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by tianpingpe at 2010-1-14 13:21:
1.买一个ta克隆的载体，如pMD19-T或者是Pmd-18t接可以，很多公司都有卖ta克隆载体的
2.做pcr的时候可以先用pfu酶保证扩增的正确，然后加入taq酶，72° 20min，在pcr产物上加上a，就可以做连接了
3。将连接产物转 ...

要是买个试剂盒那？T/A试剂盒就行吗？
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3楼2010-01-14 13:27:48
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雪山飞狐7233

铁杆木虫 (著名写手)

铁杆小虫
★ ★ ★
1949stone(金币+2,VIP+0): 1-14 17:50
liujichao(金币+1,VIP+0): 1-15 09:27
国外有pcr产物回收试剂盒，专门回收200bp以下的产物。然后做TA克隆进行测序。
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梦在路就在！
4楼2010-01-14 14:54:36
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tianpingpe

新虫 (小有名气)
★ ★
1949stone(金币+1,VIP+0): 1-14 17:50
liujichao(金币+1,VIP+0): 1-15 09:27
t/A试剂盒就可以
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5楼2010-01-14 16:52:12
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ysxnj

金虫 (小有名气)
谢谢楼主
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6楼2010-01-14 20:08:50
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