| 查看: 783 | 回复: 5 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 liyouran85 的 16 个金币 ，回帖就立即获得 1 个金币，每人有 1 次机会 | |||
liyouran85金虫 (小有名气)
|
[交流]
【求助/交流】有关补平酶切粘末端的问题 已有2人参与
|
||
| 我的片段系双酶切切下，一端3'凹另一端5'凹，都需要补平后连入载体的sma1位点，是不是不能用pfu 补平阿？t4呢？请教方法，谢谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有152人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
liyouran85
金虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 690.9
- 红花: 3
- 帖子: 155
- 在线: 127小时
- 虫号: 487083
- 注册: 2007-12-28
- 专业: 微生物生理与生物化学
2楼2010-01-13 16:23:37
3楼2010-01-13 17:31:04
liyouran85(金币+1):谢谢参与
amisking(金币-1):不要纯表情发帖哦！ 2010-04-18 13:06
amisking(金币-1):不要纯表情发帖哦！ 2010-04-18 13:06
 |
4楼2010-01-13 23:46:12
louyiceng
荣誉版主 (知名作家)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 贵宾: 10.921
- 金币: 19042.7
- 红花: 8
- 沙发: 1
- 帖子: 6329
- 在线: 337.6小时
- 虫号: 34457
- 注册: 2004-01-27
- 性别: GG
- 专业: 有机分子功能材料化学
5楼2010-04-18 09:49:09
lixg
铁杆木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 61 (初中生)
- 金币: 7627.1
- 散金: 1
- 红花: 7
- 帖子: 591
- 在线: 106.4小时
- 虫号: 859417
- 注册: 2009-09-29
- 专业: 发育生物学
★ ★ ★
liyouran85(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+2): 2010-04-18 13:07
liyouran85(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+2): 2010-04-18 13:07
|
酶切产物用乙醇沉淀，最终用25的ddH2O溶解。 补平： 在1.5 ml Eppendorf 管中加入下列成分： 10反应缓冲液 2.5 l微升 0.1% BSA 2.5 微升 1.7 mM dNTP mix 2.5 微升 酶切产物 16 微升 70度C放置5分钟，移入37度C水浴中。 加入1.5 微升 T4 DNA聚合酶，轻轻混匀，37度C 反应5分钟，用震荡器剧烈震荡使酶失活，乙醇沉淀，最后溶解在20微升l的ddH2O中。然后进行连接反应。 |
6楼2010-04-18 12:00:49
