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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】土壤DNA做PCR
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生物00

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】土壤DNA做PCR

我分别用普通方法和试剂盒提出DNA，没有纯化进行PCR.如果不加BSA全都P不出来，加了BSA后，用试剂盒提出的DNA能P出500bp的片段，普通方法的P不出来，但同时阴性对照也有500bp的带。我知道出阴性的原因是BSA带菌，但是为什么阴性都出了反而普通方法的P不出来呢？
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1楼 2010-01-08 17:42:21
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yuanbo934

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
纯化一下DNA，将DNA适当稀释，提高Mg离子浓度,同时也要注意PCR偏好性问题。我们也用上述方法提DNA，扩增没问题。
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14楼2010-01-25 20:08:58
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mever

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1,VIP+0): 1-8 17:55
也许是你普通组的DNA里腐植酸的含量过高 影响了tag酶的活性 导致PCR反应结果不理想
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2楼2010-01-08 17:54:14
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g0079

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by mever at 2010-1-8 17:54:
也许是你普通组的DNA里腐植酸的含量过高 影响了tag酶的活性 导致PCR反应结果不理想

有没有什么方法能让普通组的也P出来呢
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3楼2010-01-08 18:09:29
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g0079

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by g0079 at 2010-1-8 18:09:

有没有什么方法能让普通组的也P出来呢

加BSA不是可以保护Taq吗
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4楼2010-01-08 18:10:35
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