应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】扫描电镜生物样品制备方法
61/1返回列表
查看: 772  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

guozilqh

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】扫描电镜生物样品制备方法

请教各位大虾，欲对培养细胞体进行扫描电镜观察，求样品制备方法。
之前曾做个一次，效果不好，因本细胞体带鞭毛，样品经处理后鞭毛丢失。
上次制样方法如下：离心——2.5%戊二醛固定——乙醇梯度脱水——加入媒介剂——二氧化碳临界点干燥——镀金膜——观察。
离心后细胞体团集在一起造成鞭毛脱落，因此想将细胞体分散固定在盖玻片上进行观察。因此请教各位有经验的同志分享一下实验经验。谢谢！
此外，样品干燥这一步能否使用冷冻干燥法或其他可以替代二氧化碳临界点干燥法。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2010-01-08 11:16:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘超_2009
2楼2010-01-08 11:31:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tianpingpe

新虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+5,VIP+0): 1-9 21:18
①        2.5%的戊二醛固定2h。
②        磷酸缓冲液（pH6.0，0.1M）清洗2-3次，每次15-30min。
③        1%锇酸固定1h，蒸馏水清洗4次，每次15-30min。
④        2%单宁酸处理2-24h（单宁酸能和锇酸结合，增加电子反差，增加更多锇酸分子与样品分子的结合）。
⑤        蒸馏水清洗4次，每次15-30min。
⑥        1%锇酸固定1h，蒸馏水清洗4次，每次15-30min。
⑦        脱水：分别用50%、70%、80%、100%、100%的乙醇处理10min。
⑧        叔丁醇-乙腈干燥法：75%叔丁醇，20min；100%叔丁醇，10min；叔丁醇-乙腈（2:1），10min；叔丁醇-乙腈（1:1），10min；乙腈（100%），10min。
⑨        离子度膜。
⑩        扫描电镜观察。
这个是我们做真菌的步骤，希望对你有帮助
赞一下(11人) 回复此楼
3楼2010-01-08 11:50:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaodeyaode

木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by tianpingpe at 2010-1-8 11:50:
①        2.5%的戊二醛固定2h。
②        磷酸缓冲液（pH6.0，0.1M）清洗2-3次，每次15-30min。
③        1%锇酸固定1h，蒸馏水清洗4次，每次15-30min。
④        2%单宁酸处理2-24h（单宁酸能和锇酸结合，增加电子反差，增加更多锇酸分 ...

请教：

您做的丝状真菌吗？还是酵母?

我们实验室做丝状真菌，液体培养后，想收集菌丝团/菌丝球 做电镜，感觉不是单个的细胞，是否可以做这样两种：

1、菌丝形态观察（单个菌丝形态观察），是否要把菌球打散？还是直接做？还是用固体培养的菌丝做，比液体培养的好？

2、直接用菌丝球做，观察菌球的结构

3、请问液体培养后，培养物进行离心，然后收集菌体后，再按你说的这些步骤做可以吗？

先谢谢！！
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-01-09 13:08:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guozilqh

铜虫 (初入文坛)
谢谢2楼的虫子，不过还有个小问题想请教一下，你的样品是离心后的收集的样品还是固定的玻片上呢？
赞一下 回复此楼
5楼2010-01-09 14:57:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaodeyaode

木虫 (职业作家)
请tianpingpe老师解答
赞一下 回复此楼
6楼2010-01-10 09:53:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 guozilqh 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 317求调剂 +10 申子申申 2026-03-19 16/800 2026-03-22 17:03 by ColorlessPI
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
[考研] 293求调剂 +12 zjl的号 2026-03-16 17/850 2026-03-22 16:51 by i_cooler
[考研] 一志愿北京化工大学 070300 学硕 336分 求调剂 +3 vv迷 2026-03-22 3/150 2026-03-22 15:18 by 杨杨杨紫
[考研] 求调剂 +7 Auroracx 2026-03-22 7/350 2026-03-22 12:38 by 素颜倾城1988
[考研] 354求调剂 +7 Tyoumou 2026-03-18 10/500 2026-03-22 11:11 by 人来盛
[考研] 一志愿南大，0703化学，分数336，求调剂 +3 收到VS 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:42 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +6 Mqqqqqq 2026-03-19 6/300 2026-03-21 08:04 by JourneyLucky
[考研] 310求调剂 +3 baibai1314 2026-03-16 3/150 2026-03-21 03:56 by JourneyLucky
[考研] 083200学硕321分一志愿暨南大学求调剂 +3 innocenceF 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:35 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕英一数二306 +7 z1z2z3879 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:48 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂 +9 何润采123 2026-03-18 11/550 2026-03-20 23:19 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中海洋材料工程专硕330分求调剂 +8 小材化本科 2026-03-18 8/400 2026-03-20 23:16 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交通 专硕 材料355 本科双非 求调剂 +5 西南交通专材355 2026-03-19 5/250 2026-03-20 21:10 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[考研] 081700化工学硕调剂 +3 【1】 2026-03-16 3/150 2026-03-19 23:40 by edmund7
[考研] 材料与化工求调剂 +7 为学666 2026-03-16 7/350 2026-03-19 14:48 by 尽舜尧1
[考研] 290求调剂 +3 p asserby. 2026-03-15 4/200 2026-03-17 16:35 by wangkm
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭