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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请问割胶该注意什么啊
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815kathy

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请问割胶该注意什么啊

最近在做16S 的PCR，最后要测序，需要割胶，请教一下各位在割胶的时候需要注意什么呢，比如制胶的浓度、厚度为多少利于割胶，非常感谢！
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1楼 2010-01-08 08:50:23
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chong2009

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
请问如何才能提高胶回收效率？
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7楼2010-01-08 19:58:47
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gxsulong

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2,VIP+0): 1-8 17:29
回收胶的浓度一般是0.6~0.8%
割胶时要快：DNA长时间暴露在紫外下会产生缺刻
准：多余的胶不要切，以免对后面的回收率产生影响
赞一下(21人) 回复此楼
霉菌
2楼2010-01-08 08:56:55
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+3,VIP+0): 1-8 17:29
我们胶回收时的浓度是1.2-2%，我是用盒子回收的，盒子对任意浓度都可以，但是高于2%的第一步要多加Buffer。如果楼主不是用盒子回收，应该要注意使用低熔点胶，不是标准琼脂糖
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3楼2010-01-08 09:24:05
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cato8163

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by gxsulong at 2010-1-8 08:56:
回收胶的浓度一般是0.6~0.8%
割胶时要快：DNA长时间暴露在紫外下会产生缺刻
准：多余的胶不要切，以免对后面的回收率产生影响

关于回收浓度，小可没有太注意，但一般制胶厚一点。
切胶快，和2楼说的一样，怕突变和缺刻。
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4楼2010-01-08 09:36:21
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