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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PAGE电泳
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青青草hwj

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PAGE电泳

我在做核酸聚丙烯酰胺电泳哦，怎么做出来的条带跟MARKER的颜色不一样哦？marker是黄色，其他带是黑色?
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1楼 2010-01-07 15:16:03
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yang0071

木虫 (职业作家)
★ ★
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1949stone(金币+1,VIP+0): 1-7 20:16
marker 是哪个公司的？
有些marker是预染过的
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2楼2010-01-07 19:30:56
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
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1949stone(金币+5,VIP+0): 1-7 20:16
说明你的点样量有些大，银染的时候，DNA浓度小的时候表现黄色，浓度大的时候，银离子带正电被大量吸附在DNA表面，显色的时候全部还原成金属银，发生银镜反应，使条带发黑，如果DNA浓度继续增大，你还可以看到镜面在条带上形成。

只要条带清楚，不要在意什么黄色和黑色了，不过你现在的情况我估计点样量有点大，稍微少一点，显色时间也不要太长
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3楼2010-01-07 19:38:42
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青青草hwj

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-1-7 19:38:
说明你的点样量有些大，银染的时候，DNA浓度小的时候表现黄色，浓度大的时候，银离子带正电被大量吸附在DNA表面，显色的时候全部还原成金属银，发生银镜反应，使条带发黑，如果DNA浓度继续增大，你还可以看到镜面 ...

谢谢啊，我再做试试
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4楼2010-01-08 07:44:38
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青青草hwj

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yang0071 at 2010-1-7 19:30:
marker 是哪个公司的？
有些marker是预染过的

marker是生工的哦
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5楼2010-01-08 07:44:56
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xyls6868

新虫 (小有名气)
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据说聚丙烯的胶在冬天不容易显带呢，大家有这种感觉吗呵呵？
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6楼2010-01-08 12:07:18
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
冬天由于温度低，银镜反应慢一点是正常的，不过用碳酸钠显色那种银染方法，夏天显色液也是预冷的，所以差不多，氢氧化钠那种方法，本来就很快，所以差异也不明显
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7楼2010-01-08 12:13:15
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青青草hwj

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by xyls6868 at 2010-1-8 12:07:
据说聚丙烯的胶在冬天不容易显带呢，大家有这种感觉吗呵呵？

我也有这种感觉，不知道是不是这个原因，以前能做出来的都做不出来了哦，超郁闷啊，我的实验怎么办啊？
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8楼2010-01-08 15:26:14
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yangguoliguo

银虫 (小有名气)
★
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聚丙烯凝胶电泳的室内环境温度很重要，冬夏两季在没有任何加热措施的室内进行的话，差别会很大。
所以在冬季温度较低时，你可以选择室温在20—23°C左右的环境下电泳。
电泳时缓冲液的温度要保持在55°C左右为宜。
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天行健，君子以自强不息地势坤，君子以厚德载物
9楼2010-01-08 16:51:47
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