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【求助/交流】PAGE电泳
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青青草hwj
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【求助/交流】PAGE电泳
我在做核酸聚丙烯酰胺电泳哦,怎么做出来的条带跟MARKER的颜色不一样哦?marker是黄色,其他带是黑色?
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1楼
2010-01-07 15:16:03
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yang0071
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marker 是哪个公司的?
有些marker是预染过的
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2010-01-07 19:30:56
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yujiaping1
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1-7 20:16
说明你的点样量有些大,银染的时候,DNA浓度小的时候表现黄色,浓度大的时候,银离子带正电被大量吸附在DNA表面,显色的时候全部还原成金属银,发生银镜反应,使条带发黑,如果DNA浓度继续增大,你还可以看到镜面在条带上形成。
只要条带清楚,不要在意什么黄色和黑色了,不过你现在的情况我估计点样量有点大,稍微少一点,显色时间也不要太长
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3楼
2010-01-07 19:38:42
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青青草hwj
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Originally posted by
yujiaping1
at 2010-1-7 19:38:
说明你的点样量有些大,银染的时候,DNA浓度小的时候表现黄色,浓度大的时候,银离子带正电被大量吸附在DNA表面,显色的时候全部还原成金属银,发生银镜反应,使条带发黑,如果DNA浓度继续增大,你还可以看到镜面 ...
谢谢啊,我再做试试
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4楼
2010-01-08 07:44:38
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青青草hwj
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Originally posted by
yang0071
at 2010-1-7 19:30:
marker 是哪个公司的?
有些marker是预染过的
marker是生工的哦
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2010-01-08 07:44:56
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xyls6868
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据说聚丙烯的胶在冬天不容易显带呢,大家有这种感觉吗呵呵?
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2010-01-08 12:07:18
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冬天由于温度低,银镜反应慢一点是正常的,不过用碳酸钠显色那种银染方法,夏天显色液也是预冷的,所以差不多,氢氧化钠那种方法,本来就很快,所以差异也不明显
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7楼
2010-01-08 12:13:15
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青青草hwj
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Originally posted by
xyls6868
at 2010-1-8 12:07:
据说聚丙烯的胶在冬天不容易显带呢,大家有这种感觉吗呵呵?
我也有这种感觉,不知道是不是这个原因,以前能做出来的都做不出来了哦,超郁闷啊,我的实验怎么办啊?
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8楼
2010-01-08 15:26:14
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yangguoliguo
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聚丙烯凝胶电泳的室内环境温度很重要,冬夏两季在没有任何加热措施的室内进行的话,差别会很大。
所以在冬季温度较低时,你可以选择室温在20—23°C左右的环境下电泳。
电泳时缓冲液的温度要保持在55°C左右为宜。
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天行健,君子以自强不息地势坤,君子以厚德载物
9楼
2010-01-08 16:51:47
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