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青青草hwj

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PAGE电泳

我在做核酸聚丙烯酰胺电泳哦,怎么做出来的条带跟MARKER的颜色不一样哦?marker是黄色,其他带是黑色?
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yang0071

木虫 (职业作家)

★ ★
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1949stone(金币+1,VIP+0): 1-7 20:16
marker 是哪个公司的?
有些marker是预染过的
2楼2010-01-07 19:30:56
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

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1949stone(金币+5,VIP+0): 1-7 20:16
说明你的点样量有些大,银染的时候,DNA浓度小的时候表现黄色,浓度大的时候,银离子带正电被大量吸附在DNA表面,显色的时候全部还原成金属银,发生银镜反应,使条带发黑,如果DNA浓度继续增大,你还可以看到镜面在条带上形成。

只要条带清楚,不要在意什么黄色和黑色了,不过你现在的情况我估计点样量有点大,稍微少一点,显色时间也不要太长
3楼2010-01-07 19:38:42
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青青草hwj

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-1-7 19:38:
说明你的点样量有些大,银染的时候,DNA浓度小的时候表现黄色,浓度大的时候,银离子带正电被大量吸附在DNA表面,显色的时候全部还原成金属银,发生银镜反应,使条带发黑,如果DNA浓度继续增大,你还可以看到镜面 ...

谢谢啊,我再做试试
4楼2010-01-08 07:44:38
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青青草hwj

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by yang0071 at 2010-1-7 19:30:
marker 是哪个公司的?
有些marker是预染过的

marker是生工的哦
5楼2010-01-08 07:44:56
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xyls6868

新虫 (小有名气)


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据说聚丙烯的胶在冬天不容易显带呢,大家有这种感觉吗呵呵?
6楼2010-01-08 12:07:18
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

冬天由于温度低,银镜反应慢一点是正常的,不过用碳酸钠显色那种银染方法,夏天显色液也是预冷的,所以差不多,氢氧化钠那种方法,本来就很快,所以差异也不明显
7楼2010-01-08 12:13:15
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青青草hwj

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by xyls6868 at 2010-1-8 12:07:
据说聚丙烯的胶在冬天不容易显带呢,大家有这种感觉吗呵呵?

我也有这种感觉,不知道是不是这个原因,以前能做出来的都做不出来了哦,超郁闷啊,我的实验怎么办啊?
8楼2010-01-08 15:26:14
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yangguoliguo

银虫 (小有名气)


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聚丙烯凝胶电泳的室内环境温度很重要,冬夏两季在没有任何加热措施的室内进行的话,差别会很大。
所以在冬季温度较低时,你可以选择室温在20—23°C左右的环境下电泳。
电泳时缓冲液的温度要保持在55°C左右为宜。
天行健,君子以自强不息地势坤,君子以厚德载物
9楼2010-01-08 16:51:47
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