Originally posted by tianpingpe at 2010-1-7 10:48:
1.检查你的酶是否有问题，拿其他质粒切一下，检查一下
2，重新提取质粒

Originally posted by fungixx at 2010-1-7 11:35:
你的质粒多大，切下来的片段有点小，片段太小了，即使切开了也不应定能看出来，确实有点困难啊，建议加大载体量，即使有切不开的不要紧，反正有切下来得就行。
    你切下来是干嘛用啊，如果只是为了验证，建议用 ...

Originally posted by powerfulliu at 2010-1-7 13:24:
还有一种可能，你的质粒EcoRI位点在宿主体内被甲基化了。要验证是不是这个原因，可以将这一段用PCR扩增出来再酶切，看能否切开。或者将质粒转入无甲基化的宿主后再抽提出来切个试试。Good luck！