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十年一剑888

金虫 (小有名气)

[交流] 急！提取DNA遇到的问题

我提取真菌的DNA ，在用异丙醇将DNA沉淀后，在离心管的底部出现了挺多的白色沉淀（我觉得那就是DNA了），可是在我用70% 的酒精洗过两遍之后出现了以前从未出现的问题：加入1×TE缓冲液后，白色沉淀竟然不溶解！
    难道这些白色沉淀不是DNA？如果不是DNA，那么它会是什么物质（我曾用苯：氯仿：异戊醇=25:24:1的溶液抽屉过两次，已经不再有沉淀）？
   如果是DNA，它为什么不溶呢？以前提取DNA ，都能溶解，而且条带很亮。
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1楼 2010-01-07 09:28:00
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edward12101759

金虫 (正式写手)
有可能是处理的有问题，
以前做过DNA提取，离心之后的白色沉淀一般就是DNA。
可能有其他物质的影响或者缓冲液可能有问题。
没遇到过，不太好说。
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3楼2010-01-07 09:39:18
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十年一剑888

金虫 (小有名气)
溶解DNA的TE缓冲液我也换过了，还是不溶阿！
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4楼2010-01-07 10:14:24
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駱寒

银虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
十年一剑888(金币+5,VIP+0): 1-7 12:06
不是DNA，我前段时间才提的DNA，dNA应该是絮状沉淀，有点粘糊糊的感觉。可能里面含有DNA，但大部分是酚类等其他的杂质，抽提也不能避免的，要加点别的物质，PVP之类的。若果真有dNA，就算它不完全溶解（里面的dNA已经溶解了，剩下的是杂质），你跑电泳也能看到条带的。如果完全看不到条带，那就要加一些去杂质的东西重新提取了
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我不懒
6楼2010-01-07 10:22:47
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zdmei

金虫 (小有名气)
可能是蛋白，抽提时还是一定要少吸些上清
或者可能是盐
如果觉得操作没问题，沉淀是半透明的话，就延长溶解时间4度过夜或24h
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7楼2010-01-13 17:44:37
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