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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】引物二聚体
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刘超_2009

新虫 (小有名气)
觉得增加模板浓度，同时适当降低引物浓度也可以达到效果吧，让更多的模板去竞争引物，这样引物的二聚化现象会减少些
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11楼2010-01-08 09:44:29
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 刘超_2009 at 2010-1-8 09:43:

疑惑：用量降低了后，在P时是不是影响它的扩增效果啊?倒觉得增加模板浓度，同时适当降低引物浓度也可以达到效果吧，让更多的模板去竞争引物，这样引物的二聚化现象会减少些

形成二聚体还可以扩增出来，就说明引物还是相对过量的，只能适当减少，当然不能减少太多，不然扩增效率是会受到影响的
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12楼2010-01-08 11:03:31
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elalei1999

铜虫 (小有名气)
学习中.....
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不抛弃，不放弃！
13楼2010-01-09 11:16:38
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欣晴5832

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 刘超_2009 at 2010-1-8 09:43:

疑惑：用量降低了后，在P时是不是影响它的扩增效果啊?倒觉得增加模板浓度，同时适当降低引物浓度也可以达到效果吧，让更多的模板去竞争引物，这样引物的二聚化现象会减少些

我当时就是这样去掉引物二聚体的，你可以设置一个梯度，找到效果最好的组合。
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14楼2010-01-10 10:10:19
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wangp3102

新虫 (初入文坛)
1。提高退后温度是以方面
2.冰上加样，这样可以减少一些
3.酶的问题
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15楼2010-01-20 15:21:36
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gn2003_0

金虫 (小有名气)
可能原因
1、引物设计不合理
2、模板浓度过小，适当加大模板量，增加引物和模板结合的机会
3、Taq酶，引物，Mg2+浓度可能过高，可降低它们的浓度
4、增加循环数
5、退火温度较低有条带，则应逐渐提高温度，若提高温度的同时产物量减少，则考虑增加镁离子浓度（根据扩增片断长度而定，片段长则相应镁离子浓度应该高一些）最可能原因
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16楼2010-01-20 15:32:03
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zxy7576

新虫 (小有名气)
????~
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不论什么时候，什么处境，都不要忘记自己最初的梦想！
17楼2010-01-29 21:28:58
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