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haverain

金虫 (正式写手)

MR

[交流] 【求助/交流】EB染色DNA后,紫外下分解问题?

用EB染了DNA,EB浓度很大,一开始条带清晰,但是置于紫外灯下观察切胶,发现一两分钟内条带亮度明显变小,以至于看不清切胶。有么有同志遇到类似情况?
现在怀疑的情况有:EB变质;紫外灯功率太大等等。????谢谢了
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-1-5 15:25:
紫外灯能够淬灭EB,所以EB原液、干粉才需要避光保存,这也是EB去污的一种方法。一些紫外透照台兼具长波和短波紫外,可以根据成像或者切胶的需要调节。

紫外能够使得DNA形成嘧啶二聚体,这些交联的碱基在复制的 ...

说得很详细了,很有道理,长时间暴露EB会淬灭。DNA也会被紫外灯打断,但即使断了条带还是在原来的位置,不会看不见的
9楼2010-01-05 17:48:30
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09021122

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
1949stone(金币+4,VIP+0):很细致 1-5 15:19
haverain(金币+2,VIP+0):thanks 1-7 00:58
一:EB染色后在紫外灯下,DNA一般很少降解的  除非紫外很强。
二:结合到DNA链上的EB很少,大部分是不结合的。
三:在割胶时尽量一个一个的割,每隔一次,关闭紫外灯。
四:要迅速处理DNA样品。
五:割胶的紫外线不要太强!!!
雄关漫道真如铁,而今迈步从头越
2楼2010-01-05 13:05:36
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haverain

金虫 (正式写手)

MR

引用回帖:
Originally posted by 09021122 at 2010-1-5 13:05:
一:EB染色后在紫外灯下,DNA一般很少降解的  除非紫外很强。
二:结合到DNA链上的EB很少,大部分是不结合的。
三:在割胶时尽量一个一个的割,每隔一次,关闭紫外灯。
四:要迅速处理DNA样品。
五:割胶的紫 ...

谢谢你,你主要觉得是紫外灯太强造成的是吧,我们也倾向于这样解释
虚心请教,认真学习!
3楼2010-01-05 13:11:04
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09021122

木虫 (正式写手)

恩  我觉得应该是的,一般情况下,DNA是不容易分解的
雄关漫道真如铁,而今迈步从头越
4楼2010-01-05 13:15:36
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