应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】EB染色DNA后，紫外下分解问题？
101/1返回列表
查看: 965  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

haverain

金虫 (正式写手)

MR

[交流] 【求助/交流】EB染色DNA后，紫外下分解问题？

用EB染了DNA，EB浓度很大，一开始条带清晰，但是置于紫外灯下观察切胶，发现一两分钟内条带亮度明显变小，以至于看不清切胶。有么有同志遇到类似情况？
现在怀疑的情况有：EB变质；紫外灯功率太大等等。？？？？谢谢了
回复此楼

» 猜你喜欢
虚心请教，认真学习！
1楼 2010-01-05 12:47:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

09021122

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
1949stone(金币+4,VIP+0):很细致 1-5 15:19
haverain(金币+2,VIP+0):thanks 1-7 00:58
一：EB染色后在紫外灯下，DNA一般很少降解的  除非紫外很强。
二：结合到DNA链上的EB很少，大部分是不结合的。
三：在割胶时尽量一个一个的割，每隔一次，关闭紫外灯。
四：要迅速处理DNA样品。
五：割胶的紫外线不要太强！！！
赞一下(11人) 回复此楼
雄关漫道真如铁，而今迈步从头越
2楼2010-01-05 13:05:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haverain

金虫 (正式写手)

MR
引用回帖:
Originally posted by 09021122 at 2010-1-5 13:05:
一：EB染色后在紫外灯下，DNA一般很少降解的  除非紫外很强。
二：结合到DNA链上的EB很少，大部分是不结合的。
三：在割胶时尽量一个一个的割，每隔一次，关闭紫外灯。
四：要迅速处理DNA样品。
五：割胶的紫 ...

谢谢你，你主要觉得是紫外灯太强造成的是吧，我们也倾向于这样解释
赞一下 回复此楼
虚心请教，认真学习！
3楼2010-01-05 13:11:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

09021122

木虫 (正式写手)
恩  我觉得应该是的，一般情况下，DNA是不容易分解的
赞一下 回复此楼
雄关漫道真如铁，而今迈步从头越
4楼2010-01-05 13:15:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
新配EB试试。
回复此楼
Thank-you，so-blue.
5楼2010-01-05 13:19:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

randomqd

木虫 (小有名气)

樱花骑士
★
1949stone(金币+1,VIP+0):谢谢 不过为什么呢？ 1-5 15:19
DNA尽量少暴露在紫外光下
赞一下(10人) 回复此楼
未来天空才是极限
6楼2010-01-05 13:36:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★
司马诸葛(金币+2,VIP+0): 1-5 21:51
haverain(金币+2,VIP+0): 1-7 00:59
紫外灯能够淬灭EB，所以EB原液、干粉才需要避光保存，这也是EB去污的一种方法。一些紫外透照台兼具长波和短波紫外，可以根据成像或者切胶的需要调节。

紫外能够使得DNA形成嘧啶二聚体，这些交联的碱基在复制的时候就会卡住，然后会被酶系随机插入一个碱基修复，造成突变。所以速度第一。
赞一下(11人) 回复此楼
7楼2010-01-05 15:25:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

randomqd

木虫 (小有名气)

樱花骑士
LS说得对，紫外交联了对后序的克隆影响很大，有可能导致实验失败。。。
赞一下 回复此楼
未来天空才是极限
8楼2010-01-05 16:31:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-1-5 15:25:
紫外灯能够淬灭EB，所以EB原液、干粉才需要避光保存，这也是EB去污的一种方法。一些紫外透照台兼具长波和短波紫外，可以根据成像或者切胶的需要调节。

紫外能够使得DNA形成嘧啶二聚体，这些交联的碱基在复制的 ...

说得很详细了，很有道理，长时间暴露EB会淬灭。DNA也会被紫外灯打断，但即使断了条带还是在原来的位置，不会看不见的
赞一下 回复此楼
9楼2010-01-05 17:48:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘超_2009

新虫 (小有名气)
★ ★
haverain(金币+2,VIP+0):谢谢交流 1-7 00:59
这两方面都有吧，估计是你开紫外灯的时间太长了，切一个开一个吧，再说EB浓度也不用那么高，它与DNA的结合与它的浓度没太大关系，适量就可以了。另外建议就是，操作尽可能快些
赞一下 回复此楼
10楼2010-01-06 10:44:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 haverain 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 307中医考研调剂 +9 于以采蘩 2026-04-14 9/450 2026-04-19 08:41 by 烟雨流涯
[考研] 生物学调剂 +10 纸扇zhishan 2026-04-13 10/500 2026-04-18 21:19 by zqndavala
[考研] 接受任何调剂 +6 也就是栗子 2026-04-17 7/350 2026-04-18 17:20 by 涵竹刘
[考研] 化学070300 求调剂 +29 哈哈哈^_^ 2026-04-12 29/1450 2026-04-18 15:56 by Equinoxhua
[考研] 260求调剂 +4 Zyt1314520.. 2026-04-17 5/250 2026-04-18 08:28 by babysonlkd
[考博] 申博/考博 +3 啃面包的小书虫 2026-04-17 4/200 2026-04-17 23:54 by 阳阳阳^_^
[考研] 304求调剂 +7 castLight 2026-04-16 7/350 2026-04-17 20:05 by 关一盏灯cd
[考研] 322求调剂 +6 tekuzu 2026-04-17 6/300 2026-04-17 13:48 by Espannnnnol
[考研] 291求调剂 +11 关忆北. 2026-04-14 11/550 2026-04-16 15:18 by jiahl2024
[考研] 26药学专硕105500求调剂 +6 喽哈加油 2026-04-13 7/350 2026-04-16 14:31 by zhouxiaoyu
[考研] 求调剂推荐 +8 小聂爱学习 2026-04-14 8/400 2026-04-16 07:22 by 学员JpLReM
[考研] 289 分105500药学专硕求调剂(找B区学校) +4 白云123456789 2026-04-13 4/200 2026-04-16 00:18 by 粉沁若尘
[考研] 药学求调剂 +11 RussHu 2026-04-12 13/650 2026-04-15 19:07 by zhuwenxu
[考研] 0854调剂 +13 长弓傲 2026-04-12 16/800 2026-04-15 13:45 by fenglj492
[考研] 085801电气专硕272求调剂 +19 电气李 2026-04-13 21/1050 2026-04-15 13:37 by 黑科技矿业
[教师之家] 转长聘了 +7 简单化xn 2026-04-13 7/350 2026-04-14 14:50 by xindong
[考研] 085408光电信息工程专硕355一志愿长春光机所调剂 +6 王ymaa 2026-04-13 13/650 2026-04-14 11:33 by 王ymaa
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +24 叶zilin 2026-04-13 25/1250 2026-04-14 09:20 by 试管破裂
[考研] 考研英一数一338分 +9 长江大学东校区 2026-04-13 10/500 2026-04-14 00:41 by 王珺璞
[考研] 297工科，求调剂? +13 河南农业大学-能 2026-04-12 13/650 2026-04-13 14:12 by dingyanbo1
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭