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wangp3102

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引物特异性不好,可能是退火温度太高,建议降低一下退后温度再P一下
21楼2010-01-20 15:17:49
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gn2003_0

金虫 (小有名气)

退火温度高点了,设置阳性对照里面有目的带吗?
22楼2010-01-20 15:25:25
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sdspring

金虫 (初入文坛)

谢谢两位!退火温度将到55度了,还是没结果。

阳性对照,只设了基因组的,没问题。
引物的,因为是从基因组非编码区上扩,不会设对照。有没有人有好建议?
23楼2010-01-21 08:29:20
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松上云雀

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你用的哪个公司的酶?
拉长片段,最好用高保真酶,你可以换下酶再试一次,祝你成功。
24楼2010-01-21 09:15:41
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sdspring

金虫 (初入文坛)

谢谢楼上!

用的tiangen的普通taq酶与pfu酶。

用没有好用的酶?推荐一下?
25楼2010-01-21 09:42:43
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buster

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
或许可以用TAKARA的LA酶试试看   对于Taq酶难扩出来的  LA酶可能可以
26楼2010-01-21 10:21:01
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wgx1128

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你的模板确定没有问题吧?
可以适当加点DMSO试试
选择快乐!
27楼2010-01-21 11:00:32
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