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汕头大学海洋科学接受调剂
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jackchen129

至尊木虫 (职业作家)

[交流] 【求助/交流】酿酒酵母DNA提取

酿酒酵母DNA如何提取,最好有详细步骤。

谢谢!!!
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yuanbo934

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
(1)挑取少量菌体(一环),置于一已灭菌的1.5 ml的离心管内; (2)加入100 μl裂解液(100 Mm Tris, 30 Mm EDTA, 0.5% SDS, pH 8.0, 15P灭菌30分钟备用); (3)100 °C水浴15分钟; (4)加入100 μl 2.5 M的醋酸钾后,置于冰上30分钟至一个小时; (5)在4 °C下13000rpm离心5分钟,上清液移至一新1.5 ml离心管内; (6)加入等体积的氯仿-异戊醇(24: 1),剧烈振荡后,13000 rpm,离心15分钟,移取上清液至另一灭菌的1.5 ml的离心管内; (7)重复上一步,直到两相之间没有沉淀,将上清液移至另一灭菌的0.5 ml的离心管内; (8)加入等体积的冷的异丙醇,放置在-20 °C下静置15分钟; (9)13000 rpm离心15分钟; (10)用100 μl 70%的乙醇洗涤沉淀; (11)用100 μl 100%的乙醇再次洗涤沉淀; (12)将沉淀置于真空干燥器中抽干或自然干燥; (13)加入50 μl已灭菌的Milli-Q水,在4 °C下溶解两小时; (14)放于-20 °C冰箱内冷藏备用。 2. PCR
2楼2010-01-04 11:01:00
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yanfeier

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
一试剂盒  上面有具体的操作步骤。
二手动操作
(1)挑取少量菌体置于一已灭菌的1.5 ml的离心管内; (2)加入100 μl裂解液(100 Mm Tris, 30 Mm EDTA, 0.5% SDS, pH 8.0, 15P灭菌30分钟备用); (3)100 °C水浴15分钟; (4)加入100 μl 2.5 M的醋酸钾后,置于冰上30分钟至一个小时; (5)在4 °C下13000rpm离心5分钟,上清液移至一新1.5 ml离心管内; (6)加入等体积的氯仿-异戊醇(24: 1),剧烈振荡后,13000 rpm,离心15分钟,移取上清液至另一灭菌的1.5 ml的离心管内; (7)重复上一步,直到两相之间没有沉淀,将上清液移至另一灭菌的0.5 ml的离心管内; (8)加入等体积的冷的异丙醇,放置在-20 °C下静置15分钟; (9)13000 rpm离心15分钟; (10)用100 μl 70%的乙醇洗涤沉淀; (11)用100 μl 100%的乙醇再次洗涤沉淀; (12)将沉淀置于真空干燥器中抽干或自然干燥; (13)加入50 μl已灭菌的Milli-Q水,在4 °C下溶解两小时; (14)放于-20 °C冰箱内冷藏备用。 2. PCR
3楼2010-01-04 12:02:55
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