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【求助】真菌细胞壁中β-1，3葡聚糖酶活性的测定方法
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| 大家好，，我想测一下不同抗药水平真菌细胞壁中酶的活性的方法，，，该怎样做呢？？？？谢谢了 |
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
seamuse(金币+1,VIP+0):新年好，欢迎常来理工农林版！ 1-1 18:43
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葡聚糖酶活的测定方法主要有3种，即还原糖测定法（分光光度法）、粘度测定法和底物染色法。其中还原糖测定法（分光光度法）简便实用，比较准确，而且测定的结果重复性好，对于葡聚糖酶活的测定，一般认为是其3种方法中的首选方法；粘度测定法虽然更接近酶和底物在动物体内的作用方式，但这种方法目前仅能进行半定量描述，而且测定时比较繁琐费时；底物染色法是一种新型的方法，它是通过对底物的人工着色，然后测定颜色的变化来计算酶活，但这种方法难以操作，目前还没有得到广泛应用（王在贵等，2002）。 目前国内外采用较多的还是还原糖测定法（分光光度法），其原理是：葡聚糖酶能将葡聚糖降解成寡糖和单糖，具有还原性末端的寡糖和有还原基团的单糖在沸水浴条件下可以与DNS试剂发生显色反应。由于反应液颜色的强度与酶解产生的还原糖量成正比,而还原糖的生成量又与反应液中葡聚糖酶的活力成正比，因此，可以通过分光比色测定反应液颜色的强度，从而计算反应液中葡聚糖酶的活力（农业部标准，NY/T 911-2004）。 |
3楼2010-01-01 18:38:06
4楼2010-01-02 07:53:37