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genedemon773

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】请教大家,关于单链抗体表达后的错误折叠问题

先祝各位站友元旦快乐!

在下最近听了一场报告,其中涉及到某个单链抗体(鼠源抗体,靶向人体内的一个蛋白)的构建,抗体朝向是VH-linker-VL,linker是(Gly4Ser)3。用的表达体系是真核的CHO细胞以及原核的E.coli。尽管能够表达,但是产物却没有了原来单克隆抗体结合抗原的能力。报告人推断是可变区出现了错误折叠而导致。

请教大家:
1. 通常在什么情况下,会导致单链抗体或者蛋白表达产物的错误折叠?是linker的影响,还是表达体系的影响?

2. 如果是其他人想继续做这个scfv的话,在如上述所说的那种情形下,两个表达体系都无法使其正确折叠,那么如果换用其他的体系,如293细胞,或者其他细胞,还是否有可能使其正确折叠呢?

先谢谢大家!
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小猪吃小鱼
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1949stone

荣誉版主 (知名作家)

海纳百川


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
祝您元旦快乐,可变区折叠错误,有可能!
海纳百川止于至善
2楼2010-01-01 10:45:08
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genedemon773

银虫 (初入文坛)

多谢版主热心回复!

还想请教一下,通常导致表达产物折叠错误的因素大致有哪一些?可否排除linker区域的影响?因为靶向同一抗原的另一种单抗用同样的linker表达出了活性产物,就是这种单抗不行。
小猪吃小鱼
3楼2010-01-01 10:53:24
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yzhang1986

铁杆木虫 (文坛精英)

优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by genedemon773 at 2010-1-1 10:53:
多谢版主热心回复!

还想请教一下,通常导致表达产物折叠错误的因素大致有哪一些?可否排除linker区域的影响?因为靶向同一抗原的另一种单抗用同样的linker表达出了活性产物,就是这种单抗不行。

学习一下

你最好用引用回复该贴,别人才可能看到你的提问
4楼2010-01-01 11:11:42
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genedemon773

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by yzhang1986 at 2010-1-1 11:11:


学习一下

你最好用引用回复该贴,别人才可能看到你的提问

谢谢3楼版主的建议
小猪吃小鱼
5楼2010-01-01 11:14:31
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genedemon773

银虫 (初入文坛)

如果有做抗体的战友请多多指教
我自己不是做抗体的,但是又对这个抗体很感兴趣。
不知道linker的朝向会不会也影响了折叠呢?在这种情况下,如果换成了VL-linker-VH,可否解决问题
小猪吃小鱼
6楼2010-01-02 09:29:43
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