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genedemon773银虫 (初入文坛)
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[交流]
【求助/交流】请教大家,关于单链抗体表达后的错误折叠问题
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先祝各位站友元旦快乐! 在下最近听了一场报告,其中涉及到某个单链抗体(鼠源抗体,靶向人体内的一个蛋白)的构建,抗体朝向是VH-linker-VL,linker是(Gly4Ser)3。用的表达体系是真核的CHO细胞以及原核的E.coli。尽管能够表达,但是产物却没有了原来单克隆抗体结合抗原的能力。报告人推断是可变区出现了错误折叠而导致。 请教大家: 1. 通常在什么情况下,会导致单链抗体或者蛋白表达产物的错误折叠?是linker的影响,还是表达体系的影响? 2. 如果是其他人想继续做这个scfv的话,在如上述所说的那种情形下,两个表达体系都无法使其正确折叠,那么如果换用其他的体系,如293细胞,或者其他细胞,还是否有可能使其正确折叠呢? 先谢谢大家! |
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